武大青年学子《Science》RNAi新里程碑

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2009年08月17日 来源:生物通

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  生物通报道,德州大学西南医学中心生物化学系,埃默里大学神经退行性疾病研究中心,人类遗传学系,霍华休斯医学研究所的科学家在RNAi效率研究方面取得新的进展,文章C3PO, an Endoribonuclease That Promotes RNAi by Facilitating RISC Activation发表在Science上。

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生物通报道,德州大学西南医学中心生物化学系,埃默里大学神经退行性疾病研究中心,人类遗传学系,霍华休斯医学研究所的科学家在RNAi效率研究方面取得新的进展,文章C3PO, an Endoribonuclease That Promotes RNAi by Facilitating RISC Activation发表在Science上。

 

文章通讯作者是1992年毕业于武汉大学的青年助理教授刘清华(qinghua Liu,生物通译),刘清华目前在德州大学西南医学中心生物化学系任助理教授一职。

 

双链RNA对基因表达的阻断作用被称为RNA干预(RNA interference, RNAi )双链RNA经酶切后会形成很多小片段,称为siRNA,这些小片段一旦与信使RNA(mRNA)中的同源序列互补结合,会导致mRNA失去功能,即不能翻译产生蛋白质,也就是使基因“沉默”了。

 

RNAi过程中,发挥重要作用的就是siRNA复合物(RISC),核糖核酸内切酶Argonaute和单链siRNA直接指导mRNA的切割。

 

刘清华等人在这次的研究中重新构建了长双链RNA和双链体siRNA,通过果蝇Dicer-2R2D2Ago2蛋白促进RISC发挥活性。

 

研究小组构建的这个促进RISC的调节因子名为C3PO,由TranslinTrax组成的复合物,是Mg2+离子依赖性的核糖核酸内切酶,它通过清除siRNA切割mRNA的残留物来提高RISC的效。

 

这些研究结果表明,C3PO是一类可在体外试验中提高RNAi效率的RNAi重组系统蛋白。

(生物通 小茜)

 

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C3PO, an Endoribonuclease That Promotes RNAi by Facilitating RISC Activation

Ying Liu,1 Xuecheng Ye,1 Feng Jiang,1 Chunyang Liang,1 Dongmei Chen,2 Junmin Peng,2 Lisa N. Kinch,1,3 Nick V. Grishin,1,3 Qinghua Liu1,*

 

The catalytic engine of RNA interference (RNAi) is the RNA-induced silencing complex (RISC), wherein the endoribonuclease Argonaute and single-stranded small interfering RNA (siRNA) direct target mRNA cleavage. We reconstituted long double-stranded RNA– and duplex siRNA–initiated RISC activities with the use of recombinant Drosophila Dicer-2, R2D2, and Ago2 proteins. We used this core reconstitution system to purify an RNAi regulator that we term C3PO (component 3 promoter of RISC), a complex of Translin and Trax. C3PO is a Mg2+-dependent endoribonuclease that promotes RISC activation by removing siRNA passenger strand cleavage products. These studies establish an in vitro RNAi reconstitution system and identify C3PO as a key activator of the core RNAi machinery.

 

1 Department of Biochemistry, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, TX 75390, USA.

2 Department of Human Genetics, Center for Neurodegenerative Diseases, Emory University, Atlanta, GA 30322, USA.

3 Howard Hughes Medical Institute, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, TX 75390, USA.

 

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