两株HIV疫苗异军突起 成功有多远

　　

生物通报道，不久前沉寂了28年的艾滋疫苗研究获得了新的进展，美国和泰国合作的艾滋病疫苗研究取得了初步的成功，与此同时，中国科学家所做的艾滋病疫苗试验也已经完成的临床一期试验，正预备进入临床二期试验。这两个艾滋病疫苗的成功为人类早日找到艾滋疫苗带来了新的希望。

 

国产艾滋疫苗

临床Ⅰ期试验完美收官

近期，中国工程院院士、中华预防医学会会长王陇德透露：中国具有自主知识产权的艾滋病疫苗研究临床试验第Ⅰ阶段已经结束，结果显示疫苗“非常安全，效果非常好”，目前开始进入临床试验第Ⅱ阶段。

 

临床Ⅱ期试验开启顺利

参与国产艾滋病疫苗临床研究Ⅱ期一阶段的最后一组10名志愿者已在广西自治区疾控中心完成了疫苗接种工作，经过72小时观察，无一出现不良反应。至此，这一阶段共30名广西志愿者接受了疫苗接种，无一例发生严重不良反应，国产艾滋病疫苗的安全性再次得到验证。

 

Ⅱ期又分为3个阶段。在第一阶段研究中，考察的是疫苗在人体中的耐药剂量，以优化疫苗的最佳剂量。第二、第三阶段为随机、盲法、安慰剂对照研究，对免疫程序和联合免疫剂量进行探索，检验疫苗的免疫能力有多强，能否为人体提供保护。

 

美产艾滋疫苗

泰国的艾滋病临床试验是一个以社区试验为基础的随机的、多中心、双盲并且有安慰剂作为对照的临床试验，试验者通过试验对用于初免的金丝雀痘病毒载体疫苗ALVAC-HIV和用于加强的重组gp120亚单位疫苗AIDSVAX B/E分别进行了四次、两次注射。疫苗和安慰剂分别给予16402个年龄18岁到30岁之间的男性和女性受试者，他们分别来自于泰国的Rayong和Chon Buri省。这组受试人群是异性性传播的易感人群，他们对疫苗的反应会分别在从测试开始的3年时间里的每6个月进行检测。

 

ALVAC-HIV 和AIDSVAX B/E联合疫苗策略可能确实能够减少一般人群中异性性传播感染人群的HIV-1感染的风险。然而，疫苗没有改善HIV感染后的病毒载量和CD4淋巴计数。虽然这次临床试验的结果有一定意义，但是进一步的研究仍然亟待开展，从而为艾滋病疫苗的研发指明方向。

 

美产HIV疫苗档案

新型疫苗是由两种疫苗组成的“联合疫苗”，其中一种负责刺激免疫系统，使其做好攻击艾滋病病毒的准备；第二种则担当“助功手”，负责增强免疫反应。但研究人员目前尚不清楚其发挥作用的机理。

 

国产HIV疫苗档案

中国号艾滋病疫苗类型：复制型多价活病毒重组疫苗

 

疫苗载体：复制型天坛株痘苗病毒。经过基因操作技术将4个毒力基因剔除，用4个HIV的毒力基因取代。

 

该病毒载体是自1926年从天花患者的疱痂中分离出来的病毒，经连续传代减毒而获得。它具有宿主范围广、繁殖滴度高、温度稳定性好、无致癌性、易于基因工程操作等优点。而且痘苗病毒基因组容量大,非必需区多,适合于多个外源基因插入和蛋白质的正确合成、加工和翻译。

 

曾广泛应用于中国的天花疫苗，安全性得到多年的充分验证。副作用小，据资料显示，一般副作用80%以上发生于5岁以下的儿童，而高危艾滋病人群不是儿童，可以规避大部分的副作用。

 

疫苗原毒株：HIV-1 CRF-07株，目前中国流行最广的HIV毒株。

 

重组DNA抗原成分：gag、pol、env和nef基因。

 

Gag基因：

即组特异性抗原基因，编码分子量为55KD的前体蛋白（P55），由未拼接的病毒mRNA表达。P55经病毒蛋白酶切割，由N端至C端形成P17、P24、P15三种蛋白。P17称为基质蛋白（MA），附着于病毒脂质又层膜的内侧，形成毒粒的内膜，起稳定毒粒的作用。P24称及壳蛋白，形成病毒的锥形核。P15进一步被裂解为P9和P7两种核壳蛋白，与病毒的RNA结合。

 

Pol基因：

Pol基因编码病毒的逆转录酶（RT）P66和整合酶（IN）P32，由未拼接的病毒mRNA表达。RT由两个亚单位P66和P51构成，其N 端完全一致，具DNA聚合酶活性，而C端由于病毒蛋白酶的不对称切割，使一个亚单位C端的部分氨基酸被切除而失去RNA酶H的功能，另一亚单位C端的RNA酶H功能域则未被切除。HIV进行复制时，首先在RT的N端的DNA聚合酶功能区的作用下，以RNA为模板合成互补的DNA，表现出逆转录酶活性，然后在P51的协助下，P66 C端的RNA酶H功能区降解RNA/DNA 双链中的RNA链，表现为RNA酶H活性，最后以此单链DNA为模板，由P66亚单位合成互补DNA而成双链DNA，表现出DNA聚合酶功能。整合酶能够将逆转录成的双链DNA整合入宿主染色体DNA，整合过程可分三步：首先由IN在病毒线状平端DNA的3’端由3’→5’方向切下2个核苷酸，形成CA-OH-3’，同时在宿主DNA双链整合部位上各切开一5bp的切口，然后在IN的作用下，CA-OH-3’与宿主DNA切开部位的5’-P形成磷酸二酯键，最后整合部位被修补完整。

 

Env基因：

Env基因编码病毒的膜蛋白，由单一拼接的mRNA进行表达，首先在内质网内合成分子量为88KD的蛋白质，在向高尔基体的转运过程中被糖基化而成为分子量160KD（gp160）的包膜糖蛋白前体，糖基化为病毒的传染性所必须。gp160被蛋白酶切割为gp120和gp41两部分，gp120位于感染细胞和毒粒的表面，称外膜蛋白，其上有5个高变区（V1~V5）和6个保守区（C1~C6）。高变区中的V3环区是阻断HIV传播的中和抗体结合的主要靶位，gp41镶嵌于病毒的脂质双层中，称跨膜蛋白，在病毒感染过程中能够介导病毒脂膜与细胞膜的融合。gp120与 gp41的N端以非共价键结合，当HIV感染T淋巴细胞或巨噬细胞时，gp120首先与细胞表面的CD4分子结合，导致空间构象发生改变，使gp41与细胞膜充分接触而发生病毒与细胞膜的融合，病毒核心进行细胞。

 

Nef 基因：

Nef 基因由单一外显子构成，编码27KD的甲基化蛋白。Nef 蛋白是HIV复制过程中的负调节因子（negative regulation factor），具多种功能，既可进行正调节，也可进行负调节。能够增强或减弱病毒的复制，既能激活T细胞，增加病毒感染，又能抑制病毒的超感染。

（生物通 张欢）