Phase Lock Gel™ - 酚氯仿抽提核酸的最佳伴侣[新品推荐]

【字体: 时间:2010年12月17日 来源:生物通

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  为了解决酚氯仿抽提核酸中的一系列问题,天根(Tiangen)公司推出了一款独特的产品——Phase Lock Gel™ (PLG)。PLG就像一把锁,紧紧锁住了可能污染核酸的杂质,也就最大限度地释放了样品中的核酸。研究表明,与传统方法相比,核酸得率可提高30%。

对于核酸纯化,有些研究人员还是热衷于使用酚/氯仿抽提。然而,在实验过程中,除了要忍受刺鼻的气味外,还需要面对实验结果的不稳定。为避免将蛋白杂质或有机相连同上清一起吸出,我们往往会弃去一部分上清,这样会造成相当一部分样品损失,特别是小体积的酚抽提,而且不同样品无法标准化操作。反之,如果不小心混入了有机相,又会对下游实验产生抑制作用。

为了解决这一系列问题,天根(Tiangen)公司推出了一款独特的产品——Phase Lock Gel™ (PLG)。有了这款产品后,您再也不用担心吸多了或吸少了。只需将酚氯仿和样品的混合物加入预装有PLG的管子里,离心,这种专利的化合物就会在水相和有机相之间形成一层致密的固体,将中间层的蛋白杂质和下层有机相完全锁在固体之下,这样,全部水相样品可轻松吸出,完全不用担心混入杂质,也不用担心酚氯仿会不小心流出来。对于大体积的样品抽提,还可以直接将全部水相倒出而有机相依然被牢牢“锁定”在管底不会流出。


PLG就像一把锁,紧紧锁住了可能污染核酸的杂质,也就最大限度地释放了样品中的核酸。研究表明,与传统方法相比,核酸得率可提高30%。研究人员再也无需战战兢兢地移液,同时也避免了有毒化合物的危害。PLG适合于任何需要酚、酚/氯仿提取水相的方法。

针对不同应用,PLG有heavy(H)和light(L)两种密度可供选择。前者适用于碱法提质粒、RNA抽提等杂质较多(粘稠)的情况(不适合纯酚抽提),后者适用于酶切反应、cDNA合成、标记反应和常规组织的基因组DNA纯化(mouse tail除外),适合纯酚、酚氯仿、氯仿抽提。

如何选择Phase Lock Gel™?请查看表1和表2。

表1. 快速应用指南

PLG Heavy

鼠尾基因组DNA提取

采用标准的蛋白酶K/SDS有机溶剂提取鼠尾基因组DNA

质粒DNA抽提

采用碱裂解/酚抽提法

RNA提取

改良的异硫氰酸胍/酸酚法提取组织和细胞中的RNA

PLG Light

基因组DNA提取

蛋白酶K/SDS方法提取基因组DNA

琼脂糖凝胶凝胶回收

采用酚抽提法从琼脂糖凝胶中回收DNA片段

噬菌体或M13 DNA提取

标准纯化方法进行细菌DNA的分离

表2. Phase Lock Gel Heavy和Light的应用及兼容性

水相

有机相

 

/氯仿/异戊醇(25:24:1

氯仿/异戊醇

(24:1

水或缓冲液饱和的氯仿/异戊醇(24:1

水或缓冲液饱和的酚

< 0.5 M NaCl

L, H

L, H

L, H

L

< 1 mg/ml BSA

L, H

L, H

L, H

L

质粒DNA提取

H

H

H

X

组织匀浆基因组DNA提取

L, H

L, H

L, H

L

RNA提取

H

H

H

X

此外,PLG还有一个好处,它是惰性的,不受任何标准的核酸限制性酶和修饰酶的影响。您可以直接在装有Phase Lock Gel的管子里进行酶切,加热失活,再加入酚或酚氯仿抽提。常用的限制性酶(如EcoR I、Hind III等)和修饰酶(如逆转录酶、T4 DNA聚合酶、T4 DNA连接酶)反应都曾在含有PLG的管中成功进行。

Phase Lock Gel有以下几种规格,您可以按照样品体积选择最合适的。至于PLG的报价或说明书,请点击此处索取

离心管大小

样品体积

1.5 ml

100-500 µl

2 ml

100-750 µl

15 ml

1-6 ml

50 ml

5-20 ml

 

 

 

P.S. 需要特别提醒的是,PLG必须保存在室温,千万不要冷冻!

天根的免费技术咨询热线:800-990-6057

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