转染小分子RNA的新型武器-QIAGEN[选购宝典]

【字体: 时间:2011年02月17日 来源:生物通

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  除了生物通前面介绍的主流siRNA/miRNA转染试剂,各大公司还在不断研发,加推新品,力求让转染实验更简便,转染效率更高,毒性更低,或覆盖过去未曾涉及的领域(如活体转染)。首先,我们就来看看QIAGEN公司带来了哪些好东东。

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FlexiTube siRNA Premix 是典型的省时省力型试剂,它以单管形式提供了您感兴趣基因的siRNA以及高效的转染试剂,无需混合,即可直接用于细胞转染。而传统的转染实验需要先稀释siRNA,再与转染试剂混合并孵育。相比之下,此预混液可节约大量的时间和劳力。同时,FlexiTube siRNA Premix的使用也减少了实验内和实验间的差异,保证了不同实验间的高度一致性。

此外,FlexiTube siRNA Premix也不仅仅是简单的混合,其中试剂与siRNA的比率已预先优化过,确保最高的转染效率和基因沉默。你无需优化siRNA与试剂的比例,可快速启动RNAi 实验,避免了冗长的实验优化过程。目前QIAGEN提供了针对人类和小鼠基因的FlexiTube siRNA Premix。

FlexiTube siRNA Premix中包含的FlexiTube siRNA是利用HP OnGuard siRNA Design 设计的,确保其具备高特异性。siRNA的设计基于人工智能设计程序,并结合大量的RNAi实验数据。同时使用最新的序列数据库及专利的同源性分析软件对siRNA 的设计进行检测。

大家肯定关心转染效率如何,当然这也是因细胞而异的。至于难搞的原代细胞和悬浮细胞,你可以尝试一下加大用量。反之,如果你还想降低siRNA的终浓度,当然也可以,只需要使用更少量的FlexiTube siRNA Premix。例如,使用建议量的一半,这样siRNA的终浓度即为12.5 nM。取决于不同的细胞类型,有时siRNA终浓度低至1 nM也能产生高效的基因沉默。

大家都清楚,省时省力的东西一般都不省钱,FlexiTube siRNA Premix当然也不例外。如果是单独的FlexiTube siRNA,1 nmol约为930元,而Premix的目录价为1770元,其中含有0.75 nmol siRNA。当然,也不能这么直接比较,毕竟你连转染试剂的钱也省了。如果实验室可以承受的话,这确实是个省事的好选择。

另外,QIAGEN还带来了HiPerFect转染试剂的高通量版本 – HiPerFect HTS Reagent,能够高通量地转染siRNA/miRNA,适合通路分析、药物开发及miRNA功能研究。对于高通量实验而言,操作简便、结果可靠和经济实惠都很关键。HiPerFect HTS试剂能同时满足这几点。索取资料

HiPerFect HTS试剂提供了稳定可靠的转染,确保了高通量实验的一致性和可重复性。它的操作步骤也有所不同,目的是尽量减少耗材的使用,减少移液步骤,在节约资源和时间的同时也有利于标准化。

说明书中提供了在96孔板和384孔板中反式转染贴壁细胞的操作步骤。在操作过程中,细胞可在同一天接种和转染。具体过程是,siRNA先加入孔中,再加入HiPerFect HTS试剂,在复合物形成之后,将细胞加入孔中。

除了塑料耗材的节省之外,每次转染只使用少量的转染试剂,确保最大的经济效益,同时也不会折损结果的可靠性。HiPerFect HTS试剂本身也有一些优势,比如批次间一致性高,且稀释后的稳定性高。这些性质对于实际操作也蛮重要,例如,你可以在早上稀释,然后用一整天,转染效果也不会打折。

目前,HiPerFect HTS试剂已经成功转染了一些细胞系,除了常见的293、HeLa等细胞系外,HUVEC和NHDF等原代细胞也能成功转染。

HiPerFect HTS试剂目前有三种规格。迷你版(0.1 ml)的试剂适合初实验,价格为560元,适用于4-10块96孔板。而2×1 ml和6×1 ml的试剂分别为9600元和25200元。当然,如果真的用量很大,那应该会有一个不错的折扣。(生物通 余亮)

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