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SuperSignal增强剂 提高Western blot的灵敏度[新品推荐]

SuperSignal增强剂

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2011年04月01日 来源:生物通

摘要:

  赛默飞世尔公司旗下的Pierce推出了Western Blot的信号增强剂——SuperSignal Western Blot Enhancer。此增强剂包含两种试剂:抗原预处理液和一抗稀释液,能将信号强度和灵敏度提高3-10倍,从而显著降低背景,并增强低丰度和弱免疫反应性抗原的检测。

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众所周知,Western blotting是鉴定蛋白的经典方法,但此过程中存在很多变数。抗原丰度、抗体的特异性和反应性等因素都会对结果产生相当大的影响。若是高丰度蛋白,那自然好办。若不幸研究的是低丰度蛋白,最后膜上出现了若有若无的一条带,那可真是纠结啊。说没有,似乎也有一条带;说有,似乎又像是背景。

为了解决你这种烦恼,赛默飞世尔公司旗下的Pierce推出了Western Blot的信号增强剂——SuperSignal Western Blot Enhancer。此增强剂包含两种试剂:抗原预处理液和一抗稀释液,能将信号强度和灵敏度提高3-10倍,从而显著降低背景,并增强低丰度和弱免疫反应性抗原的检测。

SuperSignal增强剂使用起来也很简单。在转印之后,封闭之前,用足量的抗原预处理液浸泡膜10分钟。一抗杂交前用一抗稀释液稀释一抗。其他操作均按照Western blotting的标准操作流程进行。此增强剂可用于PVDF膜或硝酸纤维素膜,并与荧光、比色法和化学发光检测兼容。

SuperSignal Western Blot增强剂的特点如下:

  • 提高灵敏度——实现信号强度和灵敏度的3-10倍提高
  • 改善特异性——改善质量差或低亲和力抗体的信噪比
  • 更清晰——降低背景,带来更干净的Western blot
  • 兼容性好——适合PVDF膜或硝酸纤维素膜,与荧光、比色法和化学发光检测兼容

至于效果如何,让图片来说话。

细胞裂解液经过电泳分离后,转印到硝酸纤维素膜上,并利用常规方法(左)或SuperSignal Western Blot增强剂步骤(右)开展Western blotting。在上图中,带有PC-3裂解液的膜用含5%牛奶的TBST溶液封闭,并与小鼠抗CDK5(1μg/mL)和HRP结合的山羊抗小鼠IgG(0.1μg/mL)杂交。利用Pierce ECL底物检测(曝光1分钟)。在下图中,带有HeLa裂解液的膜用含有Thermo Scientific Blocker BLOTTO的TBS封闭,并与兔抗GSK3a(1μg/mL)和HRP结合的山羊抗兔IgG(0.1μg/mL)杂交。利用SuperSignal West Pico 化学发光底物检测(曝光10分钟)。

若你在Western blot中也常遇到低信号、高背景的情况,那不妨试试SuperSignal增强剂。如需了解更多信息或价格,请点击此处。(生物通 薄荷)

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