SMART技术给力新一代测序[新品推荐]

新一代测序在近几年获得了飞速发展，测序本身的速度是越来越快了，但瓶颈却变成文库制备和数据分析。很多公司都为新一代测序的文库制备推出了新产品，Clontech也是其中的一个。它利用其招牌的SMART技术，推出了一款试剂盒——SMARTer Ultra Low RNA Kit for Illumina Sequencing。此款试剂盒是与Illumina公司共同开发的，它为生成与Illumina测序仪兼容的总RNA文库提供了一个简单高效的方案。

SMART技术是一种高效合成全长cDNA的技术。它的原理如下：当反转录酶到达mRNA模板末端时，自动在新合成的cDNA末端添加几个（dC）。SMART Oligo末端的（dG）与dC互补后，反转录酶会自动转换模板延伸cDNA单链，直到SMART Oligo的末端。这样得到的所有cDNA单链都含有已知的引物序列，利用已知的引物序列可以方便地进行PCR或T7体外转录扩增。

两年前，SMART升级成为SMARTer技术，采用SMARTer II A 寡核苷酸及SMARTScribe逆转录酶。在与新的SMARTer寡核苷酸共同使用时，SMARTScribe逆转录酶的模板转换能力增强了；无论模板的大小或丰度，都更有可能合成高质量、全长的cDNA。

SMARTer Ultra Low RNA Kit正是利用改进版的SMARTer技术，实现了低至100 pg RNA的转录组分析。Clontech SMART技术与Illumina测序技术的整合产生了最为灵敏的样品制备流程，能帮助您发现转录本变体，鉴定剪接点以及确定转录本的相对丰度。

现在您只需要极少量的起始材料，显微切割组织、激光捕获细胞或生物活检样品都没问题。低至0.1 ng（100 pg）已足以产生一个高代表性的cDNA pool，用于文库构建和Illumina测序仪（包括HiSeq 2000）上的测序。尽管起始RNA可能相差很大，但通过调整PCR循环数，可获得可比的DNA产量。

SMART技术的另一个优点是只要单管，一步即可完成，不需要额外的cDNA抽提纯化或者沉淀，或者额外的酶反应，让宝贵RNA降解的风险降至最低。

Clontech的总经理Carol Lou表示：“转录组学正在快速成为生物医学研究人员的重要工具，但目前它的使用仍受到样品量限制。作为SMART技术的开发者，Clontech很高兴与Illumina合作，开发出这样一个试剂盒，让研究人员能够从极少量RNA中获得转录组信息。”

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