十分钟的细胞活性检测[新品推荐]

生物通报道，Life Technologies公司近日推出了一种PrestoBlue™ 细胞活性检测试剂，能在十分钟内获得高质量的细胞活性结果。

PrestoBlue™ 试剂是一种基于刃天青（resazurin）的即用型溶液。它利用活细胞的还原能力来定量测定细胞的增殖，从而指示细胞活性。PrestoBlue™ 试剂中包含了一种细胞通透性的化合物，这种化合物是蓝色的，且几乎没有荧光。在加入细胞后，PrestoBlue™ 试剂被活细胞的还原环境所修饰，变成红色，且荧光很强。利用荧光或吸光度测量，可检测这种变化。

整个分析流程可在10分钟内完成。首先，准备好一块待测的96孔板。然后，直接向细胞中加入PrestoBlue™ 试剂，并在37°C孵育10分钟。最后，将平板转移到分析仪中，测定信号。通过将信号与化合物浓度作图，可评估结果。除了这种标准形式，你也可以通过吸光度来检测信号，或者在室温下检测。

一说起细胞活性检测，大家肯定还想到了MTT。PrestoBlue™ PK MTT，结果会是怎么样呢？由于MTT还原后产生的Formazan不溶于水，还要再用DMSO溶解，这就延长了检测时间，也在一定程度上影响了准确性。从检测时间来看，PrestoBlue™ 的10分钟显然更快，而且比MTT更安全。

大家当然更关心PrestoBlue™ 试剂的检测效果如何。根据厂家提供的结果，对于铺板密度在100至100,000个细胞/孔的细胞，实验数据表现出极佳的线性（R2值为0.9948）。至于灵敏度，在10分钟孵育之后，PrestoBlue™ 试剂能检测低至98个细胞/孔，并且信号在很宽的稀释范围内保持线性。若孵育16小时，它还能检测10个细胞/孔。

利用PrestoBlue™ 试剂，你可以实时监控活细胞的代谢和活性，分析后的细胞可回收后继续培养或用于后续分析。当然，你也可以用铝箔将分析板罩住，保存在4°C，在1-3天内读取，这不会影响荧光或吸光度值。如果你倾向于终点分析，那么可加入3% SDS，终止反应。在记录数据前，平板可在室温下保存48小时，不过记住要避光并防止蒸发。若加入了SDS，细胞就不能继续培养了。

若你的研究对象是原代细胞或干细胞，细胞本身的量有限，那么PrestoBlue™ 试剂将是不错的选择。在评估完细胞活性后，细胞仍可以开展下游的功能分析。对于贴壁细胞和悬浮细胞，PrestoBlue™ 都能起作用。除了哺乳动物细胞，它还对细菌、昆虫、植物以及鱼的细胞起作用。

PrestoBlue™ 试剂有两种规格，25 ml和100 ml，足够2500次和10000次分析（96孔板，假定每孔100 μl。若希望了解更多资料，请点击此处。（生物通 余亮）