封面文章:新型双荧光共定位系统

【字体: 时间:2011年05月24日 来源:生物通

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  来自北京航空航天大学生物与医学工程学院,生物力学与力生物学教育部重点实验室,北京大学化学与分子工程学院等处的研究人员以绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)为材料,开发出一种新的用于活细胞内检测蛋白质相互作用的检测系统。这为细胞分子生物学和蛋白质相互作用的研究领域提供了更加灵敏实用的检测工具。这一研究成果公布在《科技导报》封面上。

  

生物通报道:来自北京航空航天大学生物与医学工程学院,生物力学与力生物学教育部重点实验室,北京大学化学与分子工程学院等处的研究人员以绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)为材料,开发出一种新的用于活细胞内检测蛋白质相互作用的检测系统。这为细胞分子生物学和蛋白质相互作用的研究领域提供了更加灵敏实用的检测工具。这一研究成果公布在《科技导报》封面上。

《科技导报》是1980年由杨振宁、李政道等美籍华裔科学家倡议在美国创办,1984年转至中国办刊并正式建社的一份综合性学术会刊,主要报道中国最优秀的自然科学和工程技术研究成果,以刊物办成中国的Science和Nature为奋斗目标,曾荣获全国科技期刊(综合类)一等奖、国家期刊奖等奖项,现为中文核心期刊、“中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)”、“中国科学引文数据库源期刊”,并已被美国《化学文摘》(CA)、《剑桥科学文摘》(CSA)、《乌利希国际期刊指南》(Ulrich)等收录。

据报道,荧光蛋白是目前细胞分子生物学广泛应用的分子探针,在细胞生物学、组织工程、基础医学领域也有广泛应用。荧光蛋白以其可以在活细胞正常生理水平下即时反应细胞、生物大分子和蛋白质相互作用的特点大大推进了活细胞内的分子探针技术的发展。例如,从发光水母Aquoria victoria中分离的绿色荧光蛋白(GFP)和来源于珊瑚Discosoma sp的红色荧光蛋白(DsRed,RFP)是两种广泛使用的荧光蛋白。

蛋白质相互作用是分子细胞生物学中的重要研究领域,也是生物功能得以实现的分子基础之一。凭借快捷灵敏,即时检测和无需破坏活细胞的特点,荧光蛋白在此领域也受到热捧。

这篇文章以GFP和RFP为材料,通过合理设计,将特异的细胞定位信号插入到对应的荧光蛋白。然后结合常规的细胞转染技术,开发出一种新的用于活细胞内检测蛋白质相互作用的检测系统。

这一新开发出的系统通过基因工程的方法将RFP和GFP的N末端和C末端插入特异的定位信号,使得两种荧光蛋白单独表达(或连接无相互作用的蛋白对)时,在细胞内的空间位置上分离。当待测蛋白A和B无直接相互作用时,它们在细胞内不会结合或者相互接近,检测系统的绿色荧光和红色荧光将会分别在细胞的核外和核内表达;当待测蛋白A和蛋白B具有直接的相互作用时,它们在细胞内会相互结合或者相互接近,两种荧光在核内会产生共定位的现象。文中采用经典的抗凋亡蛋白Bcl-2和Bak-BH3短肽作为蛋白对测试系统,共定位现象明显,系统灵敏可靠。

(生物通:万纹)
 

 

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