无限可能的信号转导研究工具[新品推荐]

【字体: 时间:2011年08月12日 来源:生物通

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  之前生物通介绍Clontech推出了4款可诱导的iDimerize蛋白二聚化系统,用于信号通路研究。很多读者都表示出了浓厚的兴趣,那么这回我们对这4款系统进行详细的介绍。

之前生物通介绍Clontech推出了4款可诱导的iDimerize蛋白二聚化系统,用于信号通路研究。很多读者都表示出了浓厚的兴趣,那么这回我们对这4款系统进行详细的介绍。

为什么要操控蛋白二聚化?

细胞中的很多关键过程都需要蛋白同源二聚化、异源二聚化,或者形成更高级别的聚合物(三聚体、四聚体等)。只有当信号分子发生相互作用时,信号级联才能激活。这些通路的激活最终将导致转录激活、效应蛋白产生、激活或分泌。可诱导的二聚化技术已广泛用于信号转导通路的诱导,但它还可以应用于其他生物过程。

iDimerize如何工作?

只需要将Dmr结构域与您的目的蛋白融合,并转染到目标细胞,表达融合蛋白。当培养基中添加了细胞通透性的二聚化因子(dimerizer)时,蛋白将会诱导与之作用。二聚化诱导因子是一种细胞通透性的有机化学小分子,这种小分子含有两个独立的motif,每个motif与特定的蛋白质结构域(Dmr domain)高亲和性地结合,该结构域可与目的蛋白质融合表达。二聚化因子促使融合蛋白质亚基之间互相靠近,可以模拟在某种调控条件下,细胞内蛋白质的二聚化过程。你可以选择在N端或C端融合Dmr结构域,当然,这得根据经验来确定。每个系统都包含了一系列载体和诱导因子,供你单独选购。

可诱导的同源二聚化

iDimerize Inducible Homodimer System利用了两个相同的结合motif(蓝色)以及一个dimerizer(黄色),可以诱导同一蛋白的两个拷贝的自结合。目的蛋白与DmrB结合结构域融合,然后加入B/B同源二聚物配体,诱导二聚化。诱导的蛋白同源二聚化已广泛用于体外和体内研究,以控制多个细胞过程,包括增殖、分化、粘附和凋亡等。

可诱导的异源二聚化

iDimerize Inducible Heterodimer System利用了两个不同的结合motif(绿色和红色)以及一个dimerizer(黄色),可诱导两个不同蛋白的结合。目的蛋白分别与DmrA和DmrC结合结构域融合,然后加入A/C异源二聚物配体,诱导二聚化。诱导的蛋白异源二聚化可用于创建受体、信号分析或其他蛋白的条件等位基因。

可诱导的基因表达

iDimerize Inducible Expression System利用了与上面异源二聚化系统相同的结合motif,这两个motif分别与转录激活结构域和DNA结合结构域融合。它可用来激活目的基因的转录。

可诱导的反向二聚化

iDimerize Reverse Dimerization System利用结合motif(紫色)使蛋白聚集,而dimerizer(黄色)则使蛋白解离。此系统可用于胞内运输的研究和调控分泌的诱导。

此系统最初是由哈佛大学和斯坦福大学的研究人员开发的,后来被ARIAD的科学家进一步开发和优化,形成了ARGENT技术。iDimerize系统正是部分基于此技术。若你之前使用过ARGENT产品,也可以方便地转换到Clontech的产品。如欲了解更多产品信息,请点击此处。(生物通 余亮)

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