Clontech带你快速捕获表达目的蛋白的细胞[新品推荐]

快速捕获表达目的蛋白的细胞

生物通报道 Clontech公司（Takara旗下全资子公司）不久前推出了CherryPicker 细胞捕获及分析试剂盒。该系统不仅可以监控表达目的蛋白或带有活性启动子的细胞，还可利用抗体包被的磁珠来捕获这些细胞。

在基因表达分析中，通常将目的基因与荧光蛋白（如GFP）基因共同表达，通过荧光来判断哪些细胞表达了目的蛋白。然而，即使你知道哪些是阳性细胞，也很难将其富集。流式细胞仪分选固然可以实现，但大部分实验室都不方便使用这台高度精密的仪器。现在，有了CherryPicker，2小时内即可实现目的细胞的捕获。

CherryPicker系统有两个版本，一个适合监控启动子活性，另一个则适合基因表达分析。在这两个版本中，又分为普通版和慢病毒版（Lenti-X），后者适合难转染的细胞。

捕获带有活性启动子的细胞

通过无启动子的CherryPicker系统，CherryPicker细胞捕获系统和Lenti-X CherryPicker细胞捕获系统，可监控目的启动子的激活，并捕获那些包含活性启动子的细胞。将一个有功能的启动子插入无启动子的pCherryPicker1报告载体中，生成一个红色荧光蛋白（CherryPicker）。此荧光蛋白展示在哺乳动物细胞的表面，随后被CherryPicker特异的抗体轻松捕获。

捕获表达目的蛋白的细胞

通过双顺反子的CherryPicker系统，CherryPicker细胞捕获系统（IRES）和Lenti-X CherryPicker细胞捕获系统（IRES），可鉴定、监控并捕获表达目的蛋白的哺乳动物细胞。IRES技术让目的蛋白与膜定位的红色荧光蛋白（CherryPicker）在同一个转录本中同时表达。表达目的蛋白的细胞必须同时表达CherryPicker，并且能通过CherryPicker特异的抗体被磁珠捕获。

至于富集的效果如何，请看下图。从混合细胞中高效地富集CherryPicker细胞。构建两种细胞群体，一种表达AcGFP1，另一种表达CherryPicker。将两种细胞以AcGFP1:CherryPicker >6:1的比例混合。使用CherryPicker Assay Kit从混合细胞中富集表达CherryPicker的细胞。富集后的AcGFP1:CherryPicker比例 >1:4。使用流式细胞仪确认富集前后细胞的分布情况。

CherryPicker细胞捕获系统包含了载体、捕获抗体和磁珠，规格为60次，价格为8565元。Lenti-X的版本则要贵一点，价格为9108元。不过，要记得自备磁力架，或者向Clontech购买。（生物通 余亮）