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Clontech推出光激活荧光蛋白[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2012年03月22日 来源:生物通
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Clontech公司(Takara旗下)近日推出了光激活红色荧光蛋白PAmCherry。它是荧光蛋白mCherry的光激活突变体,特别适合蛋白半衰期及蛋白转运通路的确定,因为激活后合成的分子不能发出荧光。因此,您所观察到的正是激活时蛋白分子的快照。通过光激活荧光蛋白,您还可以实时观察蛋白的动力学,如蛋白移位和降解等。
生物通报道 – Clontech公司(Takara旗下)近日推出了光激活红色荧光蛋白PAmCherry。它一般不发光,而在350-400 nm光下暴露一会儿之后,会发出红色荧光,适用于细胞、蛋白或细胞器的追踪。
光激活荧光蛋白,顾名思义,光照条件下才能被激活。当一定波长的光线照射到它们时,它们就会开始闪烁,发出特定颜色的光。
PAmCherry是荧光蛋白mCherry的光激活突变体,特别适合蛋白半衰期及蛋白转运通路的确定,因为激活后合成的分子不能发出荧光。因此,您所观察到的正是激活时蛋白分子的快照。通过光激活荧光蛋白,您还可以实时观察蛋白的动力学,如蛋白移位和降解等。
PAmCherry一般不发光,而在350-400 nm光下暴露一会儿之后,会发出红色荧光。荧光蛋白的最大激发波长为564 nm,而最大发射波长为595 nm。检测红色荧光蛋白(如DsRed和mCherry)的滤光片就适用于PAmCherry。
Clontech目前提供了四种亚细胞结构定位载体,能分别将PAmCherry定位到细胞膜、线粒体、肌动蛋白或微管蛋白。另外,Clontech还提供质粒和慢病毒形式的载体,让您构建自己的融合蛋白,将PAmCherry融合在N端或C端。
此外,Clontech还提供光转换荧光蛋白Dendra2。它是来源于八放珊瑚(Dendronephthya sp)的单聚体荧光蛋白质,其荧光可由绿色转换成红色。Dendra2的序列经过优化,在光转换前后均发出明亮的荧光。
通过UV-紫外(360-420 nm)或蓝色区域(460-500 nm)的光照射,Dendra2的荧光可从绿色转换成红色。转换之后,红色荧光增强150-300倍,而绿色荧光降低10-15倍。因此,红色-绿色荧光比值的增加产生了约400倍的对比度。
Dendra2荧光蛋白质可同时示踪激活后的蛋白质 (具有红色荧光) 的运动和它取代未激活的蛋白质 (具有绿色荧光) 的行为。因此,Dendra2是示踪蛋白质动态 (蛋白质的移位、降解等) 和实时监测选定细胞行为的理想选择。
Dendra2在20℃和37℃下发色团成熟快,适用于广泛的实验。哺乳动物细胞瞬时转染Dendra2 10-12个小时后,可检测到均一分布的绿色荧光信号 (例如没有凝聚现象)。Dendra2 对细胞没有毒性。(生物通 余亮)