赛默飞世尔推出一系列体外表达新品[新品推荐]

生物通报道 赛默飞世尔科技（Thermo Fisher Scientific）近日宣布推出了新的高效体外翻译试剂盒——1-Step Human High Yield In Vitro Translation (IVT) Kit。与其他的哺乳动物体外翻译系统相比，这些新的试剂盒具有连续供应装置，功能蛋白产量要高出10-100倍。

试剂盒采用经过修饰的HeLa细胞提取物来提供蛋白表达机制，产生了具有功能的全长蛋白。蛋白表达是在一个专利的迷你透析装置中进行的，此装置可连续供应核苷酸、氨基酸和产能底物，以便延长蛋白翻译反应，同时，它还能去除蛋白合成抑制剂。有了此试剂盒，蛋白表达最长可持续24小时，产量在250-750 μg/ml。

完整的1-Step High Yield IVT Kit提供了蛋白转录和翻译所需的所有组分,包括经过优化的表达载体pT7CFE1-CGST-HA-His。此载体的C端带有三个标签（GST、HA和6xHis），包含了对高水平翻译很关键的多个特征。

一步法蛋白表达很简单，只需要5个组分。转录和翻译在一个反应步骤中开展，操作相当简便。流程如下：首先，加入1x透析缓冲液，在30℃平衡30分钟。之后，加入蛋白合成试剂和DNA模板，并在30℃孵育过夜。

1-Step Human High Yield In Vitro Translation (IVT) Kit有三种规格：Mini、Midi和Maxi，反应体积分别为0.1 mL、0.25 mL和1 mL，阳性对照的产量约为250-750 μg、0.5-1.5 mg和1-3 mg。

若您不需要如此高的产量，那么可选择另外一款——1-Step Human In Vitro Protein Expression Kit。这款试剂盒可在90分钟内实现功能蛋白的高效表达，每个反应的产量达100 μg/ml。它可表达酶、磷酸化蛋白、糖蛋白以及膜蛋白，用于蛋白相互作用的研究、突变分析以及活性测定。同时，赛默飞世尔还推出了1-Step Heavy Protein In Vitro Protein Expression Kits，可稳定表达带有同位素标记的蛋白，表达出的蛋白可用于质谱分析。

另外，如果你想获得糖基化的蛋白，Human In Vitro Glycoprotein Expression Kit能帮上你的忙。它能产生正确的N-糖基化模式，让你得到与体内相同的蛋白修饰。而且，产生的糖基化蛋白主要以单一形式存在，这对下游应用很关键，比如质谱分析，与昆虫细胞裂解液相比，算是一个很大的进步。（生物通 余亮）

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