蛋白表达新选择:藻类[新品推荐]

【字体: 时间:2013年12月24日 来源:生物通

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  一提到表达系统,大家总是想到细菌、酵母、哺乳细胞。其实,我们还能有更多选择。近日,Life Technologies公司宣布推出GeneArt® 藻类表达和改造产品,是市场上首个利用微藻Chlamydomonas reinhardtii和Synechococcus elongatus进行基因修饰和表达的系统。

一提到表达系统,大家总是想到细菌、酵母、哺乳细胞。其实,我们还能有更多选择。近日,Life Technologies公司宣布推出GeneArt® 藻类表达和改造产品,是市场上首个利用微藻Chlamydomonas reinhardtii和Synechococcus elongatus进行基因修饰和表达的系统。

莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)137c和细长聚球藻(Synechococcus elongatus)PCC 7942是研究光合作用的重要模式生物。它们也充当生物燃料、保健品和特殊化学品的生物生产平台。

GeneArt® 衣藻蛋白表达试剂盒和GeneArt® 聚球藻蛋白表达试剂盒包含高表达的载体,能够促使目的基因的表达占到细胞总蛋白的10%。载体上带有6组氨酸和/或V5-His表位标签,可用于蛋白的检测和纯化。这些试剂盒中还包含了新的转化试剂,能促进DNA进入细胞,而效率比现有技术提高100倍以上。

一直以来,将外源DNA引入衣藻都是个难题,因其细胞壁很坚硬。人们通常使用玻璃珠、电穿孔等方法,但转化效率不高。MAX Efficiency® 转化试剂可提高衣藻细胞壁的通透性,促进DNA进入细胞。通过这种试剂,在10个不同的衣藻菌株中,转化效率有200倍以上的提高。

整个蛋白表达过程也相当简单。经过2-4天的解冻和复苏,藻类细胞即可用于转化。同时,将合成基因或PCR产物定向克隆到表达载体上,用于GeneArt® 菌株中的表达和改造。在转化后5-6天,即可检验表达情况。

Life Technologies合成生物学的总经理兼副总裁Nathan Wood表示:“通过结合高水平的DNA转化和蛋白表达,新上市的GeneArt® 试剂盒让研究人员能够将基础研究转化到生产模式和应用科学。我们相信这些功能将帮助藻类生物学家推进他们的研究领域,达到与酵母和大肠杆菌相当的轻松水平。”

过去,研究人员总是对藻类进行无限传代,这会使培养物发生遗传漂变,同时,他们在琼脂斜面上运输培养物,又会面临污染的风险。而新的GeneArt® 试剂盒包含试剂,让研究人员能够在-80°C冻存藻类。冷冻保存是长期保存藻类的最佳选择,因为它能减少遗传漂变,有助于实验室之间的菌株交换。

Wood谈道:“冻存自己的克隆是客户最频繁的要求之一。这将有利于这些重要模式生物的标准化,并允许研究人员之间的快速交换,从而促进该领域的发展。”(生物通 薄荷)

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