新一代上皮细胞培养基[新品推荐]

上皮细胞包括腺上皮，是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分。又由于癌起源于上皮组织，故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞，培养时生长速度往往超过上皮细胞，并难以纯化，同时上皮细胞难以在体外长期生存，而且体外培养周期较长。因此细胞纯化、延长体外培养寿命和缩短体外培养周期是上皮细胞培养的关键。

以皮肤角质形成细胞（keratinocyte，又名角朊细胞）为例，角朊细胞是构成皮肤表皮的主要细胞，其正常的增殖、分化维系着表皮正常的结构和生理功能。角阮细胞的体外培养技术是建立角肮细胞库必不可少的步骤，也是复合人工皮肤组织工程学研究的先决条件。

成纤维细胞的旺盛生长能抑制角朊细胞的增殖，因此尽可能地从分离物中减少成纤维细胞的污染并控制它们在培养时过度生长是培养成功的关键之一。

目前较常用的角朊细胞的体外培养方法可归纳为3种：

一、 组织块法

最早的角朊细胞培养方法是组织块法,将手术切取的无菌皮肤修剪为1-3mm3大小组织块,间距3-5mm排布在培养瓶底壁上,加入少量培养液,待组织块贴附后(约2-3小时),加入培养液进行培养。角朊细胞由组织块中游出,围绕组织块周围生长,呈同心圆状。这种方法的确可以使角朊细胞在体外培养下存活增殖,但缺点是无法避免成纤维细胞的污染。

二、 细胞滋养层和血清培养法

以Rheinwald和Green在1975年创立的利用经6GryY射线照射失去增殖能力的鼠3T3细胞作为滋养层细胞培养角朊细胞的方法为代表,其特征是3T3细胞滋养层和使用含FCS的培养液。这种培养方法，一般可使角朊细胞分裂50次左右,缺点是细胞培养体系需血清、涂层板和细胞滋养层（feeder cells），成本较高，操作繁琐。

三、 20世纪80-90年代，无滋养层无血清培养法 

传统的方法需要在培养液中加入一定量的血清。含血清的培养液的生物学效应早已被证实,其含有多种生长因子和活性物质有利于细胞生长,但血清成分复杂,无法准确深入地研究某种单一物质对细胞的作用及机制,因此也有学者不断探索添加各种已知成分的细胞生长所需辅剂而不含血清的细胞体外培养条件。目前较为常见的一种无血清培养体系为MCDB153(内含多种微量元素)作为基础培养基,添加EGF、INS、Hydroeortisone、BpE、Transfferin、氨基乙醇、磷酸氨基乙醇、氯化钙等辅剂,这个体系可以保持角阮细胞的快速增殖,并抑制成纤维细胞的生长,使角肮细胞在无血清条件下的体外培养获得成功。

2002年，CELLnTEC公司着眼于上皮细胞最新研究视角，专业研发上皮细胞培养基及相关产品、人原代细胞和Long-term动物细胞。推出最新一代（newest generation）适用于体外上皮细胞培养的2D、3D培养基。独特的祖细胞（Progenitor Cell）配方，模仿祖细胞体内微环境，特定维持祖细胞处于增殖状态，延缓祖细胞分化。系祖细胞专用（Progenitor Cell Targeted）培养基，即PCT培养基。

CELLnTEC上皮细胞系列产品

种类	描述
上皮细胞培养基	皮肤、前列腺、肺气道、膀胱、眼角膜等专用祖细胞培养基。
人原代细胞	皮肤、眼角膜、膀胱等原代冻存细胞
Long-term动物细胞	大鼠/小鼠的皮肤、前列腺、肺气道等25代冻存细胞。 如：MPEK 小鼠角化细胞 (CnT-07 培养基)     DF-BalbC 小鼠成纤维细胞 (CnT-05培养基)等
抗生素/抗菌素类	双抗、两性霉素、
细胞消化液	Accutase、Neutral Protease (Dispase)比Trypsin更温和
细胞冻存液	Cryo-Defined Freezing Medium 比serum/DMSO更具保护作用

自2002年，CellnTEC产品推出以来，深受广大客户一致好评，文献数量也在逐年上升。

 

       

客户评价：

“ We are using …CnT-07…and it works better than KSFM (Invitrogen) and KGM (Cambrex)”
“ CnT-20 showed better colony formation, proliferation rate, longevity and stem cell marker expression than any alternative medium tested.”
“ I made a comparison which shows that your media is the best.”
“ …more colonies and more cells in CnT-07.”
“ The medium works very well – people in the lab like it very much!”
“ I used the medium for difficult keratinocytes, and the cells look great!”
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“ I got wonderful data from your medium!” 

与传统上皮细胞培养产品相比，CELLnTEC 产品具有以前优势：

（一） 专业生产上皮细胞培养基及相关产品
   
CELLnTEC公司以上皮干细胞生物学知识为基础，着眼于上皮细胞最新研究视角，推出最新一代适用于皮肤、角膜、口腔、前列腺、乳腺、膀胱、阴道、气道等组织的上皮细胞PCT、2D、3D培养基。

大鼠原代膀胱上皮细胞在CnT-213D分化（18days）情况

人原代尿道上皮细胞在CnT-58中培养第二代细胞

大鼠原代大气道上皮细胞在3D培基中(20 days)生长情况

HEPK细胞在CnT-02 2D中标志物表达情况

上皮细胞培养基四大家族

种类	功能	特点
PCT Defined Media	保持祖细胞增殖生长	不含血清，成分已知； 低钙（0.07 mM）和无钙版本 促进细胞分裂和增殖生； 延长细胞寿命，增加传代次数 更佳的细胞形态
PCT Low-BPE Media	某些特定组织细胞增殖	含低浓度BPE（与同类产品相比低4-8倍） BPE促进细胞分裂和增殖 适用于上皮细胞细胞生长和分离或者上皮组织质量不佳时的培养
Non-PCT - 2D Differentiation	诱导细胞分化培养	可适用于原代细胞分化培养
Non-PCT -3D Differentiation	3D细胞分化培养	可适用于原代细胞分化培养
PCT：Progenitor Cell Targeted

欢迎索取上皮细胞培养基的更多资料

（二） 独特的祖细胞配方，专用上皮细胞培养基，特定维持祖细胞增殖状态
   
CELLnTEC 特有的PCT培养基是专门维持细胞处于增殖状态，并延缓细胞分化。

        
      
不同含量BPE细胞集落形成比较——BPE含量依次为：低、无、高（Invitrogen：KSFM）。

（三） 模仿祖细胞体内微环境，使体外培养环境无限接近体内，延长细胞寿命
   
干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，CELLnTEC PCT 培养基的设计理念，是充分考虑这些微环境的信号，可以精确地模仿成体干细胞生长的内部微环境，使体外细胞培养环境无限接近体内，优化了祖细胞体外培养环境，从而延长上皮细胞体外培养寿命。

       

干细胞信号级联（Stem cell signaling cascades） 

（四） 无需细胞滋养层和条件培养基，缩短体外培养周期，降低成本
    
传统的角朊细胞培养方法是以放射线处理的3T3细胞为滋养层，以FAD（3DMEM：1F12）作为培养基，体外培养周期一般需要2周。CELLnTEC产品培养基无需额外使用细胞滋养层、涂层细胞板和条件培养基，因而可有效消除细胞不稳定性、缩短潜伏期、进而缩短体外培养周期，同时还可以减少成本。

（五） 促进细胞分裂，增加传代次数
   
在上皮细胞体外培养中，CELLnTEC产品在细胞集落形成和传代次数均优于同类产品。

皮肤角化细胞通过同类培养基生长比较，结果不难看出CellnTEC的CnT-07培养基下的细胞形态和传代次数均优于其他两家。

HPEK（Human primary epidermal keratinocytes）在不同培养基中的成长情况对比

（六） 更好的细胞形态，体外细胞形态无限接近体内
   
CELLnTEC培养基可以精确地模仿成体干细胞生长的内部微环境，使体外细胞培养环境无限接近体内，优化了祖细胞体外培养环境，使上皮细胞体外培养形态更佳。

皮肤角化细胞（Skin keratinocytes）在3种不同培养基细胞形态比较（客户提供）

（七） 提供细胞增殖和分化两种版本培养基

CELLnTEC 特有的PCT培养基是专门设计维持细胞处于增殖状态，并延缓细胞分化。因此他们是不适合诱导细胞分化培养的。鉴于此，CELLnTEC 也提供非祖细胞（Non-PCT）版本的培养基，这些培养基是适合上皮细胞分化培养的。

上皮细胞培养基选择指南

组织/细胞	种类	PCT Defined培养基	PCT Low-BPE培养基	Non-PCT Defined培养基-2D Differentiation	Non-PCT Defined培养基-3D Differentiation
Keratinocytes 角化细胞	H/M	CnT-07	CnT-57	CnT-02	CnT-02-3DP
	R	CnT-03		CnT-07
Cornea眼角膜	H/M	CnT-20	CnT-50	CnT-30
Oral 口腔	H/M	CnT-24		CnT-32
Mammary乳腺	H/M	CnT-27	CnT-54	CnT-22
Prostate 前列腺	H/M	CnT-12#	CnT-52#
	R	CnT-11#
Airway 肺气道	H/M	CnT-17		CnT-23
	R	CnT-14		CnT-34
Bladder 膀胱	H/M	CnT-18	CnT-58	CnT-21
	R	CnT-16		CnT-36
Vaginal阴道	H/M	CnT-19	CnT-55	CnT-39
Fibroblasts 成纤维细胞	H/M/R	CnT-05*
Keratinocytes 角化细胞	SH	CnT-08*#
	D	CnT-09*#
*包含血清；#可以用于分化；H：Human；M：Mouse；R：Rat；SH：Sheep；D：Dog

总之，CELLnTEC上皮细胞产品无论在细胞寿命、细胞形态还是在传代次数，培养周期方面均优于其同类产品，同时是无需滋养层，无需血清成分已知培养基，是您培养上皮细胞的最佳选择。

欢迎索取上皮细胞培养基的更多资料