创新参选:巯基衍生方法解决ETD实验问题

【字体: 时间:2013年03月20日 来源:生物通

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  由于复杂蛋白质样品具有组成极端复杂和动态范围宽的特点, 使得其检测灵敏度仍旧不能满足现代分析方法的要求。特别是诸多具有重要生物学功能的蛋白质往往为低丰度蛋白质, 难于实现有效的检测。

  

“赛默飞之生物通2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。

参选项目:巯基衍生方法解决ETD实验问题

背景:由于复杂蛋白质样品具有组成极端复杂和动态范围宽的特点, 使得其检测灵敏度仍旧不能满足现代分析方法的要求。特别是诸多具有重要生物学功能的蛋白质往往为低丰度蛋白质, 难于实现有效的检测。近年来, 化学衍生技术作为一种行之有效的技术受到关注, 已广泛应用于蛋白质/多肽的高效分析, 并与多种检测技术实现了有效的结合。

其中电子转移裂解( ETD) 作为一种新型的肽段碎裂方式, 在蛋白质组学研究中获得了广泛的关注。但是在这种技术中,当前体离子所带电荷数较少时, 这一技术的优势就不能得到充分发挥。

方法改进:如果将N, N-二甲基-2-氯-乙胺( DML) 用于蛇毒半胱氨酸肽段的衍生,并结合ETD分析,只需要仅有7%的原始样品,就能完成多条肽段的全序列分析。这种巯基衍生选择性衍生技术还有助于提高含有巯基的肽段的质谱检测灵敏度。

 

赛默飞特约之生物通2012实验室创新技术评选活动: http://www.ebiotrade.com/custom/ebiotrade/cxjs-2012/index.htm

 

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