Lonza Nucleofector® Technology在神经生物学中的应用[新品推荐]

【字体: 时间:2013年09月12日 来源:基因有限公司

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  传统的脂质体转染方法和电穿孔转染技术不能有效的对神经元细胞进行转染。由于Lonza的Amaxa Nucleofector®电转仪采用的是专利的Nucleofector®技术,能够将外源基因直接导入到细胞核中,克服了脂质体转染和普通电穿孔必须依赖细胞分裂时才有可能使外源基因入核表达的缺陷。

神经元细胞属于终末分化细胞,是公认的难转染的细胞类型。传统的脂质体转染方法和电穿孔转染技术不能有效的对神经元细胞进行转染。由于Lonza的Amaxa Nucleofector®电转仪采用的是专利的Nucleofector®技术,能够将外源基因直接导入到细胞核中,克服了脂质体转染和普通电穿孔必须依赖细胞分裂时才有可能使外源基因入核表达的缺陷(Figure 1)。如果使用Nucleofector® 4D Y Unit电转模块,甚至可以对细胞进行原位贴壁电转,即使是转染冻存的原代神经元细胞也能够达到和新鲜提取的神经元一样的效果(Figure 2)。Nucleofector®技术可以使您稳定而高效的对不同种属和来源的神经细胞进行转染(Figure 3)。

Figure 1
比较了不同转染方法(依次是普通电穿孔转染,脂质体转染和Nucleofection技术)转染大鼠神经祖细胞的效率。使用上述3种方法将编码DsRed和eGFP两种荧光蛋白的质粒转入大鼠神经祖细胞,转染后24小时检测转染效率,结果如Figure1所示,使用Nucleofection转染技术的转染效率远高于脂质体转染和普通电穿孔方法。(Data from Cesnulevicius et al. (2006) Stem Cells 24(12): 2776–92).

Figure 2
使用Lonza Nucleofector 4D Y Unit原位贴壁电转新鲜制备的大鼠海马神经元(A)和经过冻存复苏后的大鼠海马神经元(B)的结果图。所使用的都是培养第五天的海马神经元,AD1 4D-Nucleofector Y kit和EH-166预置程序。结果显示,使用Lonza Nucleofector 4D Y Unit进行贴壁原位电转,即使使用冻存的神经细胞也能够得到和新鲜制备细胞一样好的结果。

Figure 3
使用Nucleofector技术对不同种属和不同来源的原代神经元细胞和原代神经胶质细胞进行转染后的效果。使用Nucleofector电转染系统转染编码eGFP或eYFP的质粒进入原代神经细胞,24-72小时后检测转染效率,结果如上图所示。(大鼠大脑皮质神经元数据来源于 J. Köhler, R. Klein, MPI for Neurobiology, Munich, Germany;其它转染数据来源于Lonza Cell & Transfection Database)

Nucleofector® Kits for Neurobiology

细胞类型

Nucleofector® II Device Kit (25 RCT)

Nucleofector® 4D System Kit (24 RCT)

Astrocytes, mouse

VPI-1006

 Basic Glial Cells Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Astrocytes, Rat

VPI-1006

 Basic Glial Cells Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Dorsal Root Ganglia,rat,neo

VPG-1003

 Rat Neuron Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Dorsal Root Ganglia,mouse

VSPI-1003

 Basic Neuron SCN Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Neural Stem Cells,mouse

VPG-1004

 Mouse Neural Stem Cell Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Neural Stem Cells,rat

VPG-1005

 Rat Neural Stem Cell Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Neural Stem Cells,human

VPG-1004

 Mouse Neural Stem Cell Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Neurons,mouse

VPG-1001

 Mouse Neuron Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Neurons,rat

VPG-1003

 Rat Neuron Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Olfactory neuronrat

VPI-1003

 Basic Primary Neurons Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

Oligodendrocyterat

VPG-1009

 Rat Oligodendrocyte Nucleofector Kit

V4XP-3024

 P3 Primary Cell 4D-Nucleofector X kit L

如需要做神经细胞的原位贴壁电转,可以选择Nucleofector® 4D System的Y Unit和AD1 4D-Nucleofector Y kit(24 RCT)

更多产品信息请咨询基因有限公司

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