Lonza为癌症研究和药物研发提供完整工具包

【字体: 时间:2014年07月04日 来源:基因有限公司

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  简单、方便的研究工具可以使得您的工作流程更加简化,Lonza可以为您提供完美生物学结果所需的研究工具,包括高质量的原代细胞,高效转染技术以及丰富的分子生物学和细胞培养工具。

癌症研究工具包

简单、方便的研究工具可以使得您的工作流程更加简化,Lonza可以为您提供完美生物学结果所需的研究工具,包括高质量的原代细胞,高效转染技术以及丰富的分子生物学和细胞培养工具。

使用原代细胞的好处:

- 更好的替代细胞系
研究发现,有些细胞系实际上与曾经被报道描述的性质有很大不同。在对500多种白血病淋巴瘤细胞的研究中,发现有15%的细胞系是被识别错的。在某项研究中,发现18-36%的细胞系被错误的认识或者发生了交叉污染。因此,一些政府机构例如NIH指定用于移植用的细胞系必须具备最高质量。原代细胞可以作为细胞系的替代品更好地显示生命活动的本质。

- 发现抗肿瘤药物最理想的细胞模型
在肿瘤药物筛选中,原代细胞被许多的文献成功报道。原代细胞是筛选抗肿瘤药物的理想选择,能够真实地代表人类的生命活动。原代细胞临床前的相关性在癌症治疗中变得越来越重要。动物实验模型中,原代细胞的培养能够在动物模型中很容易地被复制。另外,仅仅用原代细胞,研究者就已经成功地研究了化学疗法的抗药性实验。用原代细胞可以降低体内实验需要的成本和动物的数量(figure1)

Figure 1. 原代细胞和细胞系表现出不同的药物剂量反应曲线

这三种细胞类型用喜树碱处理48小时,用ViaLight™ Assay评估药物毒性。此实验中,数据点是40次重复的平均值,每块板重复8次,共5块板。EC50剂量曲线甚至相差10倍。HEK293细胞只需要68nM喜树碱浓度即可杀死50%的细胞。在原代细胞中,药物浓度要达到500nM的浓度。

- 生物标志物发现过程中具有生物相关性
细胞系在传代之后,基因型和表型上都会发生改变。在进行生物标志物筛选的时候,用3-10代的细胞系。这会极大的提升实验成本。原代细胞被广泛的验证使得生物标志物的发现更加具有广泛性。因为它们更好的维持了细胞表面标志物以及与人类组织相关的其它基因。消除了以细胞系或者低质量原代细胞为研究对象造成的成本昂贵以及数据的不确定性。

- 理解癌症是如何形成的
研究发现,经过基因突变和原癌基因的表达之后,原代细胞能够成功的诱导成肿瘤细胞。在体外用原代细胞可以构建体内实验的原型。

- 研究肿瘤干细胞
肿瘤干细胞来源于正常的组织干细胞,与正常的干细胞在很多方面都有相像,例如自我更新和分化的能力。原代细胞能被诱导重编程成iPSCs,这在癌症研究中具有非常广阔的应用前景。

有些通路只能用原代细胞研究

Figure 2. 有些通路只能用原代细胞研究,在细胞系中不存在这些通路。溶解性T淋巴细胞识别外部的细胞并且通过免疫突触将其裂解。在免疫突触中,CTLs分泌溶细胞性颗粒,含有穿孔素。hMUNC13-4参与了细胞融解过程。转染含有hMUNC13-4/RFP的质粒可展示hMUNC13-4的共定位(红色,H)、穿孔素(绿色,I)、胞核(蓝色)。接触目的细胞后(M),hMUNC13-4发生极化,向免疫突触聚集(L)。

Reprinted from: Feldmann J et al. (2003) Cell 115(4):461-73; with permission of Elsevier

转染癌症相关的原代细胞和细胞系

在难转染的细胞系以及原代细胞转染中,Lonza Nucleofection核转染技术在其中发挥着重要的作用。Nucleofector在从正常细胞到癌症细胞的进展以及抗肿瘤药物的研发中发挥着重要的作用。

优点
- 原代细胞和难转染肿瘤细胞系的非病毒转染方法
- 高达90%的转染效率,好的细胞活性
- 转染细胞类型和底物灵活
- 低通量和高通量不同的转染平台,如siRNA筛选
- 针对原代细胞和肿瘤细胞系,有超过100种可用的Protocol
- 超过800种癌症相关的文献支持,降低方法学优化的难度
- 无需胰酶消化转染贴壁细胞,实现贴壁细胞原位转染

应用
- 研究基因在从正常细胞到肿瘤细胞进展中的作用
- 识别潜在的药物靶点
- 肿瘤细胞系或者相应原代细胞重要结果的验证
- 研究基因表达(通过DNA、RNA或者多肽)或下调(通过siRNA或者shRNA)

Figure 3. 被Lonza Nucleofection成功转染的原代细胞和细胞系。

哪一款型号最适合您?

药物研发工具以及细胞分析工具请见下期文章。

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