基因组学大牛谈长读取测序[心得点评]

Mendelspod网站近日发布了一个“Long Read测序的崛起（The Rise of Long Read Sequencing）”的系列访谈。主持人Theral Timpson就long-read测序采访了基因组学领域的一些大牛。

第一位受访者是斯坦福大学的Mike Snyder，他最近在《Nature Biotechnology》和《PNAS》上发表文章，利用单分子实时（SMRT）测序来进行转录组分析，并证明了长reads能实现RNA分子的完全覆盖。在这次访谈中，他讨论了他的工作以及对long-read测序的看法。

Snyder在谈及转录组学时表示，若不利用long-read测序，转录组的解读方式将是疯狂的。他解释道：“我们拿到RNA，将它切成小片段，然后我们试图将它们组装回去，看看转录组是什么样子的。这是一种可怕的方式，因为我们真正想做的是了解转录本的所有异构体。当你将它们打断并再次组装时，不一定能找到正确的那一块拼图。”

在近日发表的研究中，Snyder证明了利用SMRT测序，能够产生全长的转录本，而不需要将转录本打断。“long-read测序的力量在于能够捕获到完整形式的所有信息，而不需要去拼拼图。”Snyder认为，错误组装转录本有可能使人们无法理解到底是怎么回事。例如，同一肿瘤基因的不同异构体有着截然不同的功能，或许是健康的，或许是致癌的。

在被问及“$1000基因组的竞赛是否以牺牲质量为代价”时，Snyder回答说：“是的。”他认为，根据目前所认为的“$1000基因组”，“质量仍然还未到，还存在明显的差距。”

“人们没有意识到这一点，人类基因组上仍然有几百个缺口尚未关闭，”Snyder解释道。而具有讽刺意味的是，在试图填补这些缺口的过程中，研究人员最终发现了更多错误。因此，人类基因组上的缺口数量在过去十年内一直相当稳定。

Snyder认为，PacBio的SMRT测序技术将通过跨过缺口、解决结构变化为这个问题提供一种解决方案，并为今天的测序质量提供“金标准”。

在这个系列访谈中，Theral Timpson之后还将采访Eric Schadt、Gene Myers和Dan Geraghty。敬请关注。（生物通 余亮）

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