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从Western blot的繁重劳动中解放出来[新品推荐]

【字体: 时间:2015年01月22日 来源:生物通

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  Western blot想一次成功,那几乎是mission impossible。这么多的环节,这么多的试剂,往往需要反复优化,才能获得理想的结果。然而,一家公司提出了一个很牛的口号,那就是“绝不多跑一次(Never Run a Gel Again)”。这家公司就是ProteinSimple。

Western blot想一次成功,那几乎是mission impossible。这么多的环节,这么多的试剂,往往需要反复优化,才能获得理想的结果。然而,一家公司提出了一个很牛的口号,那就是“绝不多跑一次(Never Run a Gel Again)”。这家公司就是ProteinSimple。

ProteinSimple不像其他公司那样,对传统的Western blot进行改进,而是彻底改造,利用毛细管电泳将整个过程自动化,创建出Simple Western分析。2011年,这家公司推出了Simon,第一台自动化开展Western blot的仪器。它改变了我们对于Western blot的想象,堪称蛋白实验室的“dream machine”。这台仪器上市后,市场反应热烈。

2014年初,ProteinSimple又推出了三款仪器,分别是Wes、Sally Sue和Peggy Sue。Wes(韦斯)作为经济的Simple Western仪器,能够在3小时内分析多达25个样品。Sally Sue(萨莉•苏)和Peggy Sue(佩姬•苏)则是高通量的仪器,每次能够分析96个样品。此外,Peggy Sue还能按照电荷分离蛋白,大大节省样品的用量。

这些仪器将所有步骤自动化,包括蛋白分离、免疫杂交、洗涤、检测以及数据分析。你只需将样品、一抗、二抗和检测试剂加入微孔板,按下Start就行了。之后的几小时便由你自由支配。回来时,等着你的就是完全分析好的数据了。

Simple Western可以两种方式开展 – 根据大小或电荷分离蛋白质。

基于大小的分析可在Wes、Peggy Sue或Sally Sue上开展。当蛋白沿着毛细管内一个堆积和分离基质迁移时,它们分离。分离后的蛋白固定到毛细管壁上。之后利用一抗鉴定目标蛋白,用HRP结合的二抗和化学发光底物检测蛋白。系统会自动报告检测蛋白的分子量和信号。

整个过程不需要手动操作,这大大减少了实验的可变性,提高了数据的重现性和可靠性。据统计,Western blot的实验差异性高达35-45%,而有了这些仪器,差异性能够控制在15%以下。对于25个样品的分析,Wes在3小时内即可完成。即使是96个样品,19个小时也能搞定。它们能分离和检测高达440 kDa的蛋白,这对研究大蛋白的童鞋来说真是福音。

基于电荷的分析可以在Peggy Sue或NanoPro 1000上开展。基本流程同上,不过是根据蛋白的等电点来分离。这种分析最少只需25个细胞,非常适合珍贵的样品,比如激光捕获显微切割的病理细胞,流式分选的血液病细胞,细针穿刺样品等。96个样品可一次处理,在11小时后获得结果。

斯坦福大学医学院的Alice Fan表示,她对Simple Western技术最满意的地方就是它能够分析纳升级的样品。Fan将患者的组织样品保存了十多年,就是在等待一种工具来分析肿瘤细胞的蛋白质组学,而不需要用光整个样品。“这么多年来,我一直在寻找一种东西,让我能够以极少量组织开展Western blot,”她解释道。

除了帮助她节省宝贵的组织,这种仪器还让她能够利用细针穿刺,在不同时间从一名患者中抽取样品。Fan认为,这有望实时了解患者的肿瘤如何响应药物。“这是一个巨大的飞跃。”

至于哪台仪器最适合你?下表应该能帮你做出选择。如果需要详细资料或询价,请点击此处

Simple Western系统

Wes

Sally Sue

Peggy Sue

NanoPro 1000

Simple Western大小分析

 

Simple Western电荷分析

 

 

最大样品通量

25

96

96

96

运行时间(大小)

3小时

14-19小时

14-19小时

N/A

运行时间(电荷)

N/A

N/A

11小时

11小时

样品冷却(大小)

N/A

10°C

10°C

N/A

样品冷却(电荷)

N/A

N/A

3°C

3°C

(生物通 余亮)

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