2014创新产品：Peggy Sue蛋白定量分析系统

过去6年，生物通一直在追踪生命科学领域最前沿的创新产品，将其介绍给大家。2014年，生物通继续搜罗新上市的产品，为大家奉上一场技术盛宴。经过一个半月的网页和微信投票以及专家评鉴，2014生命科学十大创新产品终于出炉。

ProteinSimple公司的Peggy Sue蛋白定量分析系统从一系列蛋白产品中脱颖而出，被评为2014生命科学十大创新产品之一。其实，这并非ProteinSimple公司的产品第一次获奖。早在三年前，Simon作为市场上第一款全自动的Western blot分析仪，就已经高票当选。从Simon到Peggy Sue，我们见证了ProteinSimple的创新之路。

信号通路是细胞功能、病理机制、药物研发、疗效判断的重要研究方向。信号通路中重要蛋白的表达量变化，以及蛋白翻译后的修饰（如磷酸化、甲基化、泛素化等），对细胞生物学功能的发挥起到重要作用。对于信号通路中蛋白表达量及其修饰的定量分析，一直是蛋白质组学研究的瓶颈。

之前的技术平台如Western Blot、质谱等，虽然也在局部分析环节上有了很大的进展，但是受困于这些技术实验操作环节过多，样本使用量过大，实验间结果偏差大于35%，一直都无法很好地应用在临床及基础研究的珍稀样本上，也无法实现实验室研究向临床诊断和药物开发的转化。

Peggy Sue可通过两种不同原理对蛋白表达量及修饰变化进行定量检测。一种基于分子量不同进行蛋白自动分离，使用抗体特异杂交，化学发光，对靶蛋白表达量进行绝对定量检测。另一种通过电荷变化检测蛋白翻译后修饰。由于蛋白翻译后修饰会改变蛋白等电点，故不同的修饰会产生不同的电荷异构体。ProteinSimple 首创一种抗体检测所有蛋白修饰后产生的新异构体。利用此技术，美国MD Anderson肿瘤研究所在一次实验中检测出肿瘤细胞中的17种不同Akt修饰异构体，及这些异构体在不同处理条件下的协同变化。

与其他Western blot系统相比，Peggy Sue显然带来了更多的信息。基于电荷的分析数据让人们更加深入地了解蛋白质状态，如磷酸化、糖基化等翻译后修饰，从而有助于弄清蛋白功能和作用机理。通过结合分子量和电荷分析，研究人员如今获得了开发生物标志物的更多线索。

Peggy Sue系统使用毛细管作为抗体杂交的实验反应器，可将反应体系从ml级降为nl级，从而实现微量样本的蛋白分析。它目前已经成功应用于激光捕获显微切割特异性病理细胞、流式分选血液病细胞、细针穿刺样本等珍稀样本。

此外，Peggy Sue 还具有ProteinSimle公司之前推出的全自动蛋白分析系统的所有优点。蛋白上样、蛋白分离、免疫杂交、化学发光，全部自动完成，且96个样本的分析只需要11-19个小时，实验间CV控制在10%以内。同时，它还能实现高达440 kD大分子量蛋白的检测。

据ProteinSimple中国区的应用科学家邓先生介绍，美国国立癌症研究所、斯坦福大学医学院等著名机构，以及国内的长海医院、中国医学科学院等研究单位已经成为Peggy Sue的第一批用户，正开展包括肿瘤干细胞、肿瘤分子靶向治疗机理、白血病、帕金森氏症、转化医学等研究。

不知不觉，Simple Western技术上市已有五个年头。目前，这个家族包括四个成员：Wes（分子量分析）、Sally Sue（分子量分析）、Peggy Sue（分子量和电荷分析）以及NanoPro 1000（电荷分析）。它们各有特点，详见下表。

Simple Western系统	Wes	Sally Sue	Peggy Sue	NanoPro 1000
Simple Western大小分析	●	●	●
Simple Western电荷分析			●	●
最大样品通量	25	96	96	96
运行时间（大小）	3小时	14-19小时	11-19小时	N/A
运行时间（电荷）	N/A	N/A	11小时	11小时
样品冷却（大小）	N/A	10°C	10°C	N/A
样品冷却（电荷）	N/A	N/A	3°C	3°C

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