第二军医大学孙树汉教授Hepatology发表肝再生研究新发现

【字体: 时间:2015年01月12日 来源:生物通

编辑推荐:

  孙树汉教授课题组应用Arraystar Mouse LncRNA芯片发现长链非编码RNA—lncRNA-LALR1在肝再生过程中通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进了肝细胞增殖,首次揭示了长链非编码RNA在肝再生过程中的作用。

  

第二军医大学孙树汉教授课题组长期致力于肝脏病理生理的研究。其课题组使用Arraystar LncRNA芯片在肝癌的研究中取得众多突破,科研成果连续刊发于Cancer cell, Molecular cell, Hepatology等国际顶级期刊。近期,其课题组应用Arraystar Mouse LncRNA芯片发现长链非编码RNA—lncRNA-LALR1在肝再生过程中通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进了肝细胞增殖,首次揭示了长链非编码RNA在肝再生过程中的作用。该研究成果刊登在国际顶级杂志Hepatology(影响因子11.665)。(芯片实验由康成提供技术服务

研究背景:
肝再生指的是在大部分肝切除或肝损伤后,残肝细胞通过细胞增殖由基本不生长状态转变为快速生长状态,以补偿丢失、损伤的肝组织和恢复肝脏的生理功能。肝再生在肝癌切除和肝移植等肝脏疾病的术后恢复中发挥重要作用,对于肝脏疾病患者,肝再生不足往往是致命的。长链非编码RNA (lncRNA) 是目前生物学和医学研究领域的热门分子,lncRNA在很多肝脏病理过程,特别是在肝癌中发挥重要作用,但是lncRNA在肝再生过程中的作用和机制目前还不清楚。孙树汉教授陈吉龙教授课题组本次研究目的是利用Arraystar Mouse LncRNA 芯片对lncRNA在肝再生过程中的功能机制展开系统研究。

研究思路:
对于大部分肝切除小鼠模型,作者利用美国Arraystar Mouse LncRNA芯片分别在肝切除后的0,1.5,12和24小时检测肝组织的lncRNA和mRNA表达。通过STEM分析(趋势分析)和mRNA的GO分析表明Wnt/β-Catenin信号通路富集程度最高。CNC分析(共表达分析)发现18个lncRNAs与Wnt/β-Catenin信号通路中的差异表达mRNA具有明显的 共表达关系。进一步对该18个lncRNAs进行RT-PCR验证,结合序列同源性分析筛选得到与人高度同源的lncRNA-LALR1,以该lncRNA作为研究目标进行后续研究。

作者分别通过RNAi和过表达方法在体外实验中发现lncRNA-LALR1能够明显促进肝细胞增殖。WB和FACS实验表明,lncRNA-LALR1能够明显加快肝细胞周期,从而促进肝细胞增殖。在小鼠模型体内实验中,结合RNAi/过表达同样发现,lncRNA-LALR1通过调控细胞周期促进肝细胞增殖。

作者进一步研究lncRNA-LALR1的作用机制。TOP/FOP实验表明,lncRNA-LALR1能够激活Wnt/β-Catenin信号通路。RNAi和过表达实验发现,lncRNA-LALR1能够显著抑制Axin1的表达。后续深入的RIP、RNA pull-down和ChIP实验表明,lncRNA-LALR1能够招募CTCF至Axin1启动子区域从而抑制Axin1的表达,进而激活Wnt/β-Catenin信号通路,促进Cyclin D1表达,从而促进细胞增殖。

点击了解康成生物芯片平台和高通量测序平台>>

技术路线:


 

结果展示:  


 
  
A. 聚类图显示差异表达的lncRNA(左图),差异表达的mRNA(右图);
B. 差异表达lncRNA/mRNA的趋势分析(左图),最富集的趋势变化(右图);
C. GO分析,Wnt信号通路富集程度最高;
D. CNC分析,紫色表示编码基因,绿色和红色表示lncRNA;
E. RT-PCR检测lncRNA-LALR1在肝切除不同时间点的表达水平。

研究意义:
该研究首次揭示了lncRNA在肝再生过程中的作用机制。在肝再生过程中,lncRNA-LALR1的表达水平在不同时间点有明显变化。功能机制实验表明,lncRNA-LALR1招募转录因子CTCF至Axin1启动子区域,抑制Axin1的表达;进而激活Wnt/β-Catenin信号通路,促进Cyclin D1表达,从而促进细胞增殖,在肝再生过程中发挥积极作用。利用该机制,通过药物干预lncRNA-LALR1诱导肝再生,可能对肝衰竭和肝移植患者的治疗起到促进作用。

原文出处:
LncRNA-LALR1 accelerates hepatocyte proliferation during liver regeneration by activating Wnt/β-Catenin signaling. Hepatology. 2013.
欢迎索取原文,请联系康成销售工程师,或拨打免费热线:400-886-5058;800-820-5058。


康成生物工程有限公司
地址:上海市虹漕路421号63号楼2楼
免费热线:400-886-5058;800-820-5058
电话:021-64451989
传真:021-64452021
网址:www.kangchen.com.cn

 

相关新闻
生物通微信公众号
微信
新浪微博
  • 搜索
  • 国际
  • 国内
  • 人物
  • 产业
  • 热点
  • 科普
  • 急聘职位
  • 高薪职位

知名企业招聘

热点排行

    今日动态 | 生物通商城 | 人才市场 | 核心刊物 | 特价专栏 | 仪器云展台 | 免费试用 | 今日视角 | 新技术专栏 | 技术讲座 | 技术期刊 | 会展中心 | 中国科学人 | 正牌代理商

    版权所有 生物通

    Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

    联系信箱:

    粤ICP备09063491号