如何又快又好地冻存细胞？[新品推荐]

细胞冻存是细胞培养中的重要环节。大家都知道，冻存技术要点是慢冻，标准的冻存程序为降温速率-1～-2ºC/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5 ºC～-10 ºC /min。之前，常用的传统方法是将冻存管置于4 ºC 30分钟--->-20 ºC 60分钟--->-80 ºC过夜--->液氮罐。不过，由于步骤较多，间隔时间又长，很容易遗忘。

之后，人们也开始使用程序降温盒。将冻存管放入程序降温盒中，再将程序降温盒放入-80ºC冰箱。由于程序降温盒中填充了异丙醇，所以能以1ºC/min的速度进行降温。然而，异丙醇属于有毒溶剂，又容易挥发，长期使用不但会对环境造成污染，也对实验人员的安全有不利影响。

迈阿密大学生物系的Kai Y为我们介绍了一种新的细胞程序降温盒。这种名为CoolCell的降温盒由美国Biocision公司生产，不需要使用酒精，就能以1ºC/min的速度对细胞降温。他表示，这种容器很容易放冻存管，在冷冻之后也很容易打开，使用很方便。

基于热传导原理和精密工程而开发，CoolCell可精确控制降温速度，适用于原代细胞、细胞系、干细胞、酵母及其他细胞类型。同时，由于不使用异丙醇，也更加环保。

据介绍，目前CoolCell已经被包括ATCC等众多机构以及科研单位所采用，代替他们之前使用的基于异丙醇的细胞程序降温盒。从客户的反馈来看，CoolCell与之前的产品在冻存细胞效果上一样好，尤其是在原代细胞的冻存上，CoolCell的结果更加稳定。

之前，研究人员利用CoolCell及其他常用的方法对两种胚胎干细胞系（RC-7和RC-10）进行冻存，并比较解冻后的细胞复苏率。他们发现，使用CoolCell，活细胞数提高33%，而附着在组织培养板上的干细胞数量增加。此外，不使用异丙醇，每年可节省相关的处理费用340美元。

如今，CoolCell这种细胞冻存方案已经被收入《Current Protocols in Immunology》的Cryopreservation and Thawing of Cells中，作为细胞冻存的标准protocol进行推广。这种降温盒也有多种规格，适合不同大小的冻存管，在选购时需要注意。（生物通 余亮）