蛋白质研究的一盏神灯

作为一名生物医学专业的研究生，真悲催呀，读着厚重艰涩的专业书，做着结果莫测的实验，就业前景还不容乐观。

做蛋白质研究的同学，那就更累了，Western Blot实验是少不了的。每天早早赶到实验室，细胞裂解，制胶，蛋白浓度定量，上样，电泳（开始电泳了，才松一口气，实验室就几台电源和电泳槽，晚了就排不上了，明日请早吧），转膜，封闭，一抗孵育，洗三遍，二抗孵育，洗三遍，ECL压片，*紧张的时刻到了， 搞得不好，两天白忙，暗房里面高度紧张，摸索曝光时间，做个三五张膜，每张膜重复压好几张胶片，这就够忙乱一两个小时了，衣服上溅满了显影液定影液，像个厨房里的大师傅。

没做实验之前，看到的文献图片是这样的：

  
等到自己动手做了，得到的图片却是这样的：

  
郁闷呀，这个时候，多想有一盏阿拉丁神灯，照亮我的蛋白质之路呀。

神灯来了，那就是基因有限公司代理的美国LI-COR公司Odyssey双色红外激光成像系统，指引您从黑暗走向光明，远离困扰。

美国LI-COR公司，利用其**的红外染料及检测技术，开发出Odyssey双色红外激光成像系统，目前全球累计销售超过5000台，中国也已超过500台，遍及国内外蛋白质研究实验室，NCBI Pubmed五月底*新检索文献已超过10000篇，来自中国的文献达到1628篇。对于蛋白质研究的实验室，Odyssey真正是不折不扣的神器。

大家熟知的WB成像，一般采用ECL化学发光法，在二抗上标记辣根过氧化酶HRP，利用HRP催化底物发光，使用胶片或CCD成像系统进行记录。

说起来简单，操作起来麻烦，方法学的缺陷也显而易见：酶催化反应本身制约条件很多，温度，酶活性，Ph值，曝光时间，都会对图像和定量结果有很大影响，导致即使同一个样品，同一张膜，先后取得的图片，相差都很大。另一个方面，酶促发光是一个非线性放大的过程，对低丰度蛋白会线性失真，对高丰度蛋白又会出现信号饱和，无论是动态范围，还是线性范围，都只能说差强人意。

  
所以，很多人认为基于ECL的WB只是定性实验，相对而言，ELISA是酶促显色终止反应，定量准确性高于ECL WB方法，才可以说是半定量蛋白质检测方法。

选用荧光素标记WB的方法，早就有人试过，但可见光荧光染料不能有效地用于检测膜上的蛋白，因为其激发和检测波长都位于可见光谱区，易形成有机膜（NC膜、PVDF膜、尼龙膜）的高背景荧光干扰，而且细胞内源荧光在裂解后释放出来，在可见光区形成较高背景，不能得到高质量图像，这是背景荧光的两个主要来源。

  
而在近红外波长区检测荧光信号，具有背景低，信噪比高的特点。因此，Odyssey可以用于检测膜上，胶上及微孔板里的蛋白或核酸，对其进行精确的定量分析。

Odyssey 方法学优势

直接成像：使用红外荧光染料标记的二抗，二抗孵育完成后，直接扫描成像，其重复性和定量准确性远优于ECL方法，实验过程更为简单。

  
1.定量准确：检测的荧光信号强度和结合的二抗数量具有线性关系，保证定量的准确性；

2.直接检测，无需加酶底物，非酶促动力学反应，无需依赖酶活性，同一张膜可以多次检测，重复性好；

3.极宽的线性范围：在红外荧光区域，背景荧光信号大大低于可见荧光区域，因此，直接红外检测具有更宽的线性范围，可以得到清晰的、锐利的条带，一次杂交中的强信号和弱信号都可以清晰成像，从而提高了实验重复性和定量精确性；

 
4.灵敏度高：与高灵敏度化学发光液相当，稳定达到pg级别；

5.实验成本低：红外荧光标记的WB实验成本低于常规化学发光，因为无需胶片和反应底物，而且高稀释比的二抗，进一步降低实验成本。

Odyssey 仪器特点

1.硬件：采用两个独立的红外激光器，产生685nm和785nm的特异性高强度激发光，分别激发红外荧光染料，产生720nm和820nm的发射光，由两个高灵敏度雪崩式光电二极管进行逐点扫描或高达22bit的CCD检测信号强度（机型不同，检测元件有异），以保证*高的灵敏度；

2.软件：功能强大的软件系统，提供图片和数据管理、定位蛋白大小和定量分析等完整功能；
3.双色成像：两种不同波长的红外荧光染料分别对生物分子（蛋白或核酸）标记，同时检测，双色输出。两个靶分子同时检测，减少了工作量，而且实验条件均等，便于数据对比，可进行准确的量化分析。

Odyssey的主要应用

Odyssey除了提升Western Blot成像质量和准确性，实现真正的定量Western Blot检测外，还有很多功能，见所未见，极大拓展蛋白质研究领域。

1.双色Western blot分析：蛋白质研究不仅有量化的要求，修饰性研究是很重要的一块。Odyssey的双色功能极大方便了蛋白表达丰度和修饰化蛋白的研究，一次实验，一张膜，一次杂交，无需stripping，就可以轻松完成总蛋白与磷酸化蛋白的定量分析实验。

 
2.双色 EMSA（电泳迁移率变化分析）：EMSA是现在做蛋白质和核酸相互作用的常用实验手段之一， Odyssey 可以直接在凝胶上进行双色分析，方便、快捷、无放射性危险。不同DNA序列探针与目标蛋白分子的竞争性结合，浓度阈值，阴性对照，一目了然，同样也是一次实验完成。完美的EMSA！

 
3. 微孔板ICW（In-Cell Western）分析：Odyssey可以直接在96或384孔板对细胞内目标蛋白进行精确定量，无需裂解，抽提蛋白，电泳，转印等一系列繁琐的步骤，直接对微孔板扫描成像，是高通量信号传导通路分析和药物筛选的*佳选择。

ICW实验流程

 
ICW实验图像与分析界面

4.其他扫描分析功能 ：Odyeesy就是一台红外荧光成像仪，还可以发挥出您可以想象到的各种功能：

比如组织切片

 
比如蛋白质芯片

 
再如CST公司主推的抗体芯片：

 
（右图为红外荧光标记抗体芯片图像及定量结果）

琳琅满目，精彩纷呈，只要您想得到，Odyssey就可以帮您做得到，完爆阿拉丁神灯，神灯可只能许三个愿望呀。

 
Odyssey Family现有上面三种机型，必有一款适合您，详情请咨询基因有限公司。