Life Tech体内转染试剂再升级[新品推荐]

【字体: 时间:2015年07月29日 来源:生物通

编辑推荐:

  众所周知,原代细胞的转染比传代细胞要难得多,而体内转染又比体外转染要难。对于这种高难度的实验,勉强使用传统的体外转染试剂(如脂质体)是没有幸福的,最好还是用专门的体内转染试剂,比如Life Technologies的Invivofectamine系列。

众所周知,原代细胞的转染比传代细胞要难得多,而体内转染又比体外转染要难。对于这种高难度的实验,勉强使用传统的体外转染试剂(如脂质体)是没有幸福的,最好还是用专门的体内转染试剂,比如Life Technologies的Invivofectamine系列。

一眨眼,Invivofectamine试剂已经升级到第三代。据Life Tech介绍,Invivofectamine 3.0试剂是一种无动物来源成分的脂质纳米颗粒,通过尾部静脉注射,能够将siRNA和miRNA高效导入小鼠肝脏细胞。

转染效果如何?这通常是我们最关心的。Life Tech做过实验,将Invivofectamine 3.0试剂与针对Factor VII或PPIB的siRNA混合,以每千克小鼠体重1 mg的注射量进行静脉注射,最终实现了高达85%的knockdown。与之前的产品相比,新试剂只需更少的siRNA,即可实现有效knockdown。此外,knockdown效果可维持长达3周。

同时,大家也期盼转染试剂的毒性超低。Life Tech曾评估Invivofectamine 3.0试剂的体内毒性,在试剂注射后的多个时间点进行血液化学分析及细胞因子检测。结果表明转染后每个个体的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有显著差异。这表明复合物表现出极低的体内毒性。

Invivofectamine 3.0试剂的使用也非常简单,只需与小分子RNA简单地混合,并进行孵育(30分钟)、稀释,和注射即可(如下图)。Invivofectamine 3.0试剂的稳定性也相当好。一般建议长期保存在-20ºC,但实验证明试剂融化后也能在4ºC保存至少14天。即使反复冻融4次,也不会造成性能损失。

当然,体内实验比我们想象的更加复杂。Protocol再好,也不能覆盖所有的情况。因此,Life Tech也准备了一系列FAQ,供您参考。比如:

Q:我是否需要称一下小鼠的体重,还是使用标准的200 µL?
A:为了确保最佳的效果和最低的毒性,最好是确定每只动物的体重,以便提供正确的剂量并维持多个动物的剂量均一。小鼠的建议剂量是从1 mg/kg开始,并根据siRNA的效力来减少剂量。

Q:与Invivofectamine 3.0试剂混合之前,我是否需要浓缩siRNA?
A:您的siRNA浓度至少要达到1.2 mg/mL。若浓度低于1.2 mg/mL,会导致包裹效率低。我们建议您在混合之前确认siRNA的浓度。利用无RNase/DNase的水重悬siRNA之后,测定OD260的值,并计算其浓度。

更多FAQ请看:https://www.lifetechnologies.com/cn/zh/home/life-science/rnai/introduction-to-in-vivo-rnai/invivofectamine-reagent/invivofectamine-reagent-faq.html

立即索取Invivofectamine 3.0试剂的详细资料

我来说两句
0  条评论    0 人次参与
登录 注册发布
最新评论刷新
查看更多评论 > >

订阅生物通快讯

订阅快讯:

最新文章

限时促销

会展信息

关注订阅号/掌握最新资讯

生物通首页 | 今日动态 | 生物通商城 | 人才市场 | 核心刊物 | 特价专栏 | 仪器龙虎榜

版权所有 生物通

Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

联系信箱:

粤ICP备09063491号