每个实验室都必备的小巧荧光计[选购宝典]

【字体: 时间:2015年08月14日 来源:生物通

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  市场上有多款荧光计,相信可满足你的需求。它们有一些共同的特点:为单个样品而设计,因此与微孔板检测仪相比,体积小巧;基于滤光片,经济实惠;预设程序,操作简单,几乎是一键式的。这么美好的仪器,让人很难拒绝。现在,就让我们来一睹芳容吧。

核酸定量是每个实验室都离不开的任务。随着新一代测序的普及,我们也需要一些工具,来快速完成质量控制或精确定量。分光光度计?虽然经济又实惠,但灵敏度有点低,而特异性又不够高,无法区分DNA、RNA或蛋白质。因此想说爱它不太容易。荧光检测,虽然有点昂贵,但由于出色的灵敏度和特异性,而逐渐成为样品定量的金标准。

荧光检测,你的选择有很多,比如高端的多功能酶标仪,它能够完成荧光强度、荧光偏振、荧光共振能量转移等检测。然而,对于一般的分子生物学或蛋白研究实验室而言,这未免太高大上了。我们只是想静静地测个核酸或蛋白而已。

这时,小巧方便的荧光计便是你的最佳选择。一般来说,这些仪器带有配套使用的染料,针对单链DNA、双链DNA、RNA或蛋白质。在使用过程中,你只需将染料与样品混合,孵育几分钟,然后放入荧光计中,按下按钮就行了。根据事先绘制的标准曲线,荧光计能够显示待测目标分子的浓度。

市场上有多款荧光计,相信可满足你的需求。它们有一些共同的特点:为单个样品而设计,因此与微孔板检测仪相比,体积小巧;基于滤光片,经济实惠;预设程序,操作简单,几乎是一键式的。这么美好的仪器,让人很难拒绝。现在,就让我们来一睹芳容吧。

Qubit® 3.0荧光计(Life Technologies)

一转眼,Qubit已经升级到了3.0,虽然没有之前那么萌,但易用程度再次升级。5.7英寸的彩色触摸屏和Android系统,使得操作非常简单直观。浓度计算和设置都由仪器自动完成。若样本浓度处于延伸范围或超出范围,屏幕上均会有图形显示。

Qubit 3.0拥有强大的双核处理器,5秒内可准确定量DNA、RNA和蛋白。无论是单链DNA,还是双链DNA,都能准确区分。此外,Life Tech还新推出了Qubit microRNA Assay Kit,可准确定量miRNA。这个分析是miRNA选择性的,即使mRNA存在,也能检测分析管中低至0.5 ng的miRNA。

Qubit 3.0荧光计采用荧光染料与特异性的目标分子结合。只有在与目标分子结合时,这些荧光染料才会发出荧光,因此与传统的紫外分光光度计相比,Qubit更加准确。同时,由于荧光检测的灵敏度高,那么低浓度的样品也不是问题。Qubit 3.0最低检测1 μL样品(10 pg/μL DNA或12.5 μg/mL蛋白),适合那些珍贵而稀有的样品。

测量工作也很简单,所有Qubit® 试剂盒均采用相同的操作方案,只是孵育和读数稍有差异。其中DNA和RNA分析试剂盒仅需孵育2分钟,而蛋白分析试剂盒需要15分钟。1-20 μL样本均可使用。Qubit 最多可储存1000个样本结果,你可以通过U盘导出,也可以使用USB连接线直接与电脑相连。

此外,Qubit 3.0还能变身成为小型的荧光计。在荧光计模式下,仪器产生并显示每个样品的原始荧光数据(RFU)。配合MyQubit在线工具使用,你就可以创建新的分析类型。这个模式允许你可以手动选择发射光源:蓝光LED或红光LED。如果选择蓝光发射,仪器读取绿色或远红外通道的荧光;如果选择红光发射,则仅读取远红外通道的荧光。哎哟,不错哦!

立即索取Qubit 3.0荧光计的详细资料

Quantus™ 荧光计(Promega)

Quantus™ 荧光计也是个可爱的家伙。它的大小为22.7 cm x 11.5 cm,看上去有点像手持刷卡机,当然,并没有那么多的按键。这是一台双通道的个人型荧光计,每次测定一个样品。利用QuantiFluor® 染料,可轻松定量单链或双链DNA以及RNA。

在制备样品时,我们有时要面对一些低浓度的样品,比如FFPE组织。这些样品的浓度在分光光度计的检出限以下,让人束手无策。有了Quantus™ 荧光计,这些不再是问题。在检测双链DNA时,Quantus的检出限为10 pg/μL,比NanoDrop足足高了200倍。这样,你就能准确计算样品中DNA或RNA的量,自信地开展下游分析。

高灵敏度,再加上高特异性,以及宽动态范围,让Quantus™ 荧光计成为那些重要应用的心水之选,比如NGS。据Promega介绍,这台仪器已成功用于多个NGS系统,包括Illumina的HiSeq和MiSeq,以及Life Tech的Ion PGM和Ion Proton系统。当然,那些常规应用,比如PCR、克隆、转染啊,也不在话下。

仪器的校准过程也很简单,不需要每次建立标准曲线。只需测定两个数值即可,一个是空白样品,另一个是代表标准曲线上最高点的标准品。Quantus™ 荧光计保存校准数据,用于后续测定。仪器在使用时无需电脑,可保存并显示最近20次的测定。不过在安装免费的Quantus™软件之后,它能够自动将定量结果转移到电脑上,通过Excel导出。

QFX荧光计(DeNovix)

DeNovix公司的名头不太响,但实力却不容小觑。这家公司的创始人当年开发出NanoDrop超微量分光光度计,开创了超微量样品检测的新时代。2007年,NanoDrop公司被赛默飞世尔收购,而这些牛人之后创立了DeNovix公司,继续开发更强大的浓度检测技术。

QFX荧光计正是这家公司新近推出的产品。仪器带有7英寸的大显示屏,并采用安卓定制操作系统,不仅看上去高大上,使用起来也像智能手机一样方便。QFX预装了DeNovix EasyApps,开箱即用。桌面上有各种图标,比如DNA、RNA、蛋白,一目了然。

这台仪器也给予人们灵活选择荧光分析的自由度,而不必限于制造商开发的那一种。它带有四个LED光源,搭配UV、红色、绿色和蓝色滤光片。因此,大家可选择DeNovix的定量分析产品,包括宽范围、高灵敏度和超高灵敏度的试剂盒,也可以运行市售的其他分析,如Qubit、Quant-iT,或Promega的QuantiFlour。EasyApps上还提供Basic Fluorometer的功能,显示原始的RFU数据,便于开展其他分析。

QFX荧光计支持Wi-Fi,让数据存储和共享更简单。当然,你也可以通过U盘导出数据,或通过联网的打印机打印出来。这台仪器有四种颜色可供选择,这下子选择综合征患者又要犯愁了吧。小编个人觉得红色挺好看,又喜气。

这些小小的仪器可放在抽屉里,随时取用。它们灵敏、准确又方便,真是恨不得能立即拥有呢。(生物通 余亮)

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