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抗体危机:Bio-Rad的精确方案[新品推荐]

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2015年9月18日 来源:生物通

摘要:

  很难想象,若没有抗体,蛋白质研究会变成什么样。不过,这个至关重要的工具如今也遭遇了信任危机。许多已发表的研究成果被重新评估,这都是因为抗体。例如,2006年发表在《Blood》上的一篇文章(Elliott S, et al.)质疑了人促红细胞生成素受体(Epo-R)抗体的特异性。

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很难想象,若没有抗体,蛋白质研究会变成什么样。不过,这个至关重要的工具如今也遭遇了信任危机。许多已发表的研究成果被重新评估,这都是因为抗体。例如,2006年发表在《Blood》上的一篇文章(Elliott S, et al.)质疑了人促红细胞生成素受体(Epo-R)抗体的特异性。

这令人震惊,因为大量研究都依赖于这种有效性。那些研究表明,Epo-R在各种组织类型的细胞中广泛表达,包括肿瘤细胞。如果抗体存在缺陷,那么那些结果可能是错误的。不幸的是,Blood文章的作者是正确的。他们证实,Epo-R抗体表现出明显的脱靶结合。之后,其他研究小组也提出了一些证据,说明在许多情况下,Epo-R条带实际上是热休克蛋白(HSP70)。

Blood文章的第一作者Steven Elliott博士不认为,这些使用Epo-R抗体的研究人员是别有用心。不过,他们没有使用对照(特别是阴性对照)来检测假阳性的数据,或者说,他们只看到了他们想看到的。这样一来,非特异抗体的使用导致了大量有缺陷的结果,又带来了新的临床试验。毫无疑问,这些临床试验未观察到任何效果。然而,这些抗体仍在市场上销售。

这样的故事也许还有很多很多。尽管商业化产品已经出现了几十年,但抗体依然被认为是不可靠的。根据Bio-rad的调查,在研究人员检查western blot为什么会失败时,发现2/3的情况都是一抗有问题。那么问题来了,商业化抗体为何总是表现不佳?研究人员该如何改善这种局面呢?

厂商为什么做不到?

据估计,生命科学研究市场的规模达到20-25亿美元。在如此大的市场中竞争,抗体厂商应该有足够的激励,将无故障的产品推向市场。然而,至今没有一家公司能够做到。为什么?

抗体审查网站CiteAb的创始人Andrew Chalmers博士认为,通用性是厂家的主要挑战之一。“人们在各种各样的应用以及不同的物种和组织中使用抗体,”他说。“公司永远不可能验证每种用途的抗体。”

在制造抗体时,没有一家厂商能够验证产品的每个可能应用。这是个无限的任务:每个实验室、每个操作、每一组蛋白都是不同的。如果温度不能严格控制,运输也带来了新的变量。“充分验证抗体是每个最终用户的责任,”Bio-Rad研发团队的资深科学家Mark Shulewitz博士指出。

科学家的噩梦

考虑到巨大的应用范围,所有抗体都存在限制。一些抗体在用于固定细胞时,表现不太好;另一些则可能会与目标蛋白的某个区域结合,干扰其作用机制。在大多数情况下,如果抗体公司向用户提供了足够的数据,那么他们可以了解这些不足。遗憾的是,公司往往不能提供足够的信息。

因此,科学家去寻求其他来源的信息,比如引用了抗体的期刊文章。然而,这些引用也不能太说明问题。有时候,唯一一次western blot成功的图片被提交上去,也没有使用阴性对照。为了节省空间,发表的印迹图经过裁剪,放大了中心条带。这么做的目的通常不是为了欺骗其他的科学家,但使得读者对抗体的性能知之甚少。

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