抗体危机:Bio-Rad的精确方案[新品推荐]

【字体: 时间:2015年09月18日 来源:生物通

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  很难想象,若没有抗体,蛋白质研究会变成什么样。不过,这个至关重要的工具如今也遭遇了信任危机。许多已发表的研究成果被重新评估,这都是因为抗体。例如,2006年发表在《Blood》上的一篇文章(Elliott S, et al.)质疑了人促红细胞生成素受体(Epo-R)抗体的特异性。

很难想象,若没有抗体,蛋白质研究会变成什么样。不过,这个至关重要的工具如今也遭遇了信任危机。许多已发表的研究成果被重新评估,这都是因为抗体。例如,2006年发表在《Blood》上的一篇文章(Elliott S, et al.)质疑了人促红细胞生成素受体(Epo-R)抗体的特异性。

这令人震惊,因为大量研究都依赖于这种有效性。那些研究表明,Epo-R在各种组织类型的细胞中广泛表达,包括肿瘤细胞。如果抗体存在缺陷,那么那些结果可能是错误的。不幸的是,Blood文章的作者是正确的。他们证实,Epo-R抗体表现出明显的脱靶结合。之后,其他研究小组也提出了一些证据,说明在许多情况下,Epo-R条带实际上是热休克蛋白(HSP70)。

Blood文章的第一作者Steven Elliott博士不认为,这些使用Epo-R抗体的研究人员是别有用心。不过,他们没有使用对照(特别是阴性对照)来检测假阳性的数据,或者说,他们只看到了他们想看到的。这样一来,非特异抗体的使用导致了大量有缺陷的结果,又带来了新的临床试验。毫无疑问,这些临床试验未观察到任何效果。然而,这些抗体仍在市场上销售。

这样的故事也许还有很多很多。尽管商业化产品已经出现了几十年,但抗体依然被认为是不可靠的。根据Bio-rad的调查,在研究人员检查western blot为什么会失败时,发现2/3的情况都是一抗有问题。那么问题来了,商业化抗体为何总是表现不佳?研究人员该如何改善这种局面呢?

厂商为什么做不到?

据估计,生命科学研究市场的规模达到20-25亿美元。在如此大的市场中竞争,抗体厂商应该有足够的激励,将无故障的产品推向市场。然而,至今没有一家公司能够做到。为什么?

抗体审查网站CiteAb的创始人Andrew Chalmers博士认为,通用性是厂家的主要挑战之一。“人们在各种各样的应用以及不同的物种和组织中使用抗体,”他说。“公司永远不可能验证每种用途的抗体。”

在制造抗体时,没有一家厂商能够验证产品的每个可能应用。这是个无限的任务:每个实验室、每个操作、每一组蛋白都是不同的。如果温度不能严格控制,运输也带来了新的变量。“充分验证抗体是每个最终用户的责任,”Bio-Rad研发团队的资深科学家Mark Shulewitz博士指出。

科学家的噩梦

考虑到巨大的应用范围,所有抗体都存在限制。一些抗体在用于固定细胞时,表现不太好;另一些则可能会与目标蛋白的某个区域结合,干扰其作用机制。在大多数情况下,如果抗体公司向用户提供了足够的数据,那么他们可以了解这些不足。遗憾的是,公司往往不能提供足够的信息。

因此,科学家去寻求其他来源的信息,比如引用了抗体的期刊文章。然而,这些引用也不能太说明问题。有时候,唯一一次western blot成功的图片被提交上去,也没有使用阴性对照。为了节省空间,发表的印迹图经过裁剪,放大了中心条带。这么做的目的通常不是为了欺骗其他的科学家,但使得读者对抗体的性能知之甚少。


奥斯陆大学医院的Fridtjof Lund-Johansen博士利用芯片技术检验了6,000多种市售抗体。他表示,根据他的经验,许多优秀的试剂都没有引用文献。通过目前这种排名的方式,市场上任何新产品都不能和之前那些已经有数百篇引用的抗体相比较,即使它们品质卓越。

改变现状

Bio-Rad是western blot组件的老牌供应商,不过这家公司一直缺乏流程中的一个关键元素:一抗。通过开展行业内的调查并与一些顶尖科学家交流,Bio-Rad近日提出了western blot世界需要的精确解决方案。

Bio-Rad新推出的PrecisionAb™抗体产品线解决了数据缺乏和性能可靠性的问题。

• 每个抗体都经过不同细胞系的12种全细胞裂解物的验证
• 质量控制措施到位,以确保批次之间的可靠性
• 试用装让研究人员能够在特定实验的背景下检验产品
• 每个抗体都附带阳性对照裂解物,让研究人员自己能检验产品

Bio-Rad很大一部分改进在于关注特定的应用,而不是一次发布数千个抗体。PrecisionAb抗体最初集中在那些经过充分验证和严格筛选的western blot抗体,并附带广泛的验证数据。如果抗体性能欠佳,比如说信噪比低或非特异性结合,那么它不会出现在这个产品线中。同时,它不会选择性抛弃一些结果,包括未出现目的条带的结果。

研究人员在看到这些结果时需要记住,特定样品中缺乏目的条带“并不意味着蛋白不存在;这只是说明,相对而言它的丰度没那么高,”Shulewitz谈道。“研究人员了解其样品类型中目标的相对表达水平,我们也给予指导。此外,我们也提供阳性对照,让客户可以验证一下他们的结果是不是和我们一样。”

这种专业化和全面检测的组合为研究人员带来了可靠性和高价值。Bio-Rad计划扩大其抗体产品,同时仍保证高的质量和可靠性。如欲了解PrecisionAb抗体的更多信息,请访问http://www.bio-rad.com/PrecisionAbs

了解PrecisionAb抗体的更多信息

(Roumen Bogoev撰写 / 生物通编译,有删节)

原文检索

The Antibody Challenge: Bio-Rad’s Precise Solution

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