如何多快好省地做Western blot？[新品推荐]

Western blot虽然是检测蛋白质的最经典方法，但每个经历过的人都会吐槽，耗时太长了。每个实验大约要花费两天的时间，结果好，那自然神清气爽。可是，遇到白片呢？好心塞，实验又得优化。不知不觉，半个月过去了，seminar仍然没什么可汇报的。

缩短Western blot的时间，这不仅仅是你的希望，也是各大厂家的追求。为此，他们争相推出新产品，让Western blot快一点，再快一点。如今，转印的时间已经从过去的几小时缩短到现在的几分钟。至于转印前的跑胶，只要你舍得买预制胶，那也是个把小时内搞定的事情。只是后面的流程，虽说不需要太多的技巧，但也要按部就班，来来回回跑上好几次。这还让不让人好好看文献了。

正因为不需要太多的技巧，我们完全可以将这些步骤放手，交给自动化的仪器。市场上已经有一些这样的仪器，只需要你加入一抗、二抗、封闭液等试剂，它就能自动完成所有孵育和洗涤的工作。Life Technologies（赛默飞世尔旗下）的iBind蛋白印迹处理系统便是一种。

iBind系统上市两年来，得到了众多的好评。贝勒医学院的博士后Samuel Adeosun在尝试这台仪器之后，对干净的背景感到惊讶不已。“与我之前的手动操作相比，背景更低。令人惊奇的是，它居然不用电，也不需要真空抽吸，就能工作，”他说。总的来说，他认为iBind出色地完成了抗体杂交的过程。

不过，Adeosun也表示了一些遗憾，那就是它每次只能处理一块mini凝胶。也许Life Tech正是听到了这样的心声，才推出了新版的iBind Flex蛋白印迹处理系统。与之前的产品相比，iBind Flex更加灵活，可兼容不同的印迹膜规格和样品通量。

多

与第一代的iBind系统相比，iBind Flex更加灵活，能兼容不同规格的印迹膜，而样品通量也得到提高。它能够处理一块midi的印迹膜、或两块mini的印迹膜，或六条垂直剪切膜条（每条三个泳道）。这样，即使是在同一次运行中，也可以使用不同的一抗和二抗，便于你平行开展多个实验。当然，midi膜可不行哦，因为一整块是统一处理的。注意，如果是把膜剪下来，要顺着泳道垂直剪，而不是水平剪。

快

我们只要加入一抗、二抗等溶液即可离开，系统自动完成封闭、一抗和二抗孵育及所有洗涤步骤。整个过程可在3小时内完成，而你所花的，只是15-30分钟的准备时间。安心地去听讲座，或看文献，到时候回来就行了。怕忘了时间？没关系，iBind Flex的盖子上有一块区域，允许你记录孵育开始的时间，相当贴心。

好

当然，如果只是减少工作量，或许还不能打动老板，我们还需要一些漂亮的数据。对于多个单克隆和多克隆抗体而言，iBind Flex系统都带来了更高的灵敏度，以及Adeosun所说的，更低的背景。此外，自动化操作也减少了实验之间的可变性。通常，手动处理的变异系数（CV）大约在13%。而使用iBind Flex之后，CV可降至5% 以下。

省

你也许会担心抗体的用量会不会增加，特别是一抗。其实，用了iBind Flex，抗体反而节省了不少。对于我们常用的mini凝胶而言，iBind插槽只需要2 mL抗体溶液，按照1:1000的稀释比例反推，大约需要2 µL抗体，而培养皿大约需要5-10 mL。这样算来，抗体至少能节省一半以上。不过，抗体是不能够回收重用的。

怎么样？心动了吧。目前，Life Tech提供方便的iBind Flex起始套装，内含一台iBind Flex Western设备、一盒iBind Flex 卡片（10张）和一个iBind Flex溶液试剂盒，让您能立即开始操作。这种溶液适合HRP或AP标记的二抗。如果是荧光标记的二抗，建议使用另外一种荧光检测（FD）的溶液试剂盒。不过，卡片和溶液都是耗材，之后还需购买。（生物通 余亮）

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