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肺癌研究体内外模型综述

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2017年1月11日 来源:吉凯基因

摘要:

  作为世界范围内第一大常见肿瘤,肺癌也是临床科学研究的一大热门领域。据不完全统计,肺癌相关的国自然项目接近肿瘤项目总数的10%,每年发表SCI文章逾万篇。子曰:“工欲善其事,必先利其器。”想做好肺癌的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。今天就给大家聊一聊肺癌研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。

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作为世界范围内第一大常见肿瘤,肺癌也是临床科学研究的一大热门领域。据不完全统计,肺癌相关的国自然项目接近肿瘤项目总数的10%,每年发表SCI文章逾万篇。纵观这些标书和文章,最经典的思路就是研究某个抑癌基因的失活或者原癌基因的激活了。子曰:“工欲善其事,必先利其器。”想做好肺癌的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。今天就给大家聊一聊肺癌研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。

一、我需要哪种细胞模型?是否易于操作?

俗话说,实验要想做好,细胞必不可少。细胞模型有三个优点:周期短,背景干净,易出结果,所以一般都作为所有研究的第一步。下面帮大家总结了各种腺癌、鳞癌、大/小细胞及其他肺癌的常用细胞系,再也不怕用错细胞啦!

二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?

肺癌研究中动物实验主要分为两种类型:I 成瘤实验;II 病毒直接注射动物。

I 成瘤实验的操作较为常规,先在体外使用病毒感染细胞,再将感染好的细胞注射入动物体内成瘤。接种手法根据接种部位的不同而不同,肺癌中用到最多的还是皮下和原位两种。


 
*注:原位成瘤时,若不剖开体表成像,推荐使用luciferase。

II 病毒直接注射动物。大家注意了,因是活体注射,能够注射入动物体内的病毒体积有限,此类实验对病毒质量要求更高。所用的病毒需经过特殊纯化处理,确保滴度高,毒性小,不易引起炎症反应。此处以瘤内注射为例。

三、体内外模型选好了,那么我的实验需要使用哪种方法对基因进行操作呢?  

由于细胞和动物模型的不同特点,常常导致基因操作的难易程度不一样。慢病毒*是一种非常高效的基因操作工具,不仅在细胞系中具有高效的表现,在做体内实验的时候,也会经常使用,比如原位组织注射研究基因的功能。下面我们就来看一看,如何选择合适的慢病毒载体对基因进行操作吧~

*慢病毒是一种实现高效体外体内细胞感染的工具。慢病毒能够将外源基因整合入宿主细胞的基因组,使其随细胞增殖稳定表达,并且对分裂期和非分裂期的细胞均有较高感染能力,加之其安全性高、毒性低的特点 , 慢病毒已经成为现代细胞生物学研究中一种广泛应用的基因传递工具。

启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同,这些元件也需要相应变化。对于肺癌研究来说,SPA、SPB、SPC等是较为常用的组织特异性启动子。下图帮大家梳理了肺癌中常用载体的选择方案,马上定制你的专属载体,进行表型的观察。获得高分SCI、国自然基金,走上人生巅峰,指日可待!


 
上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证,月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用5项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。

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参考文献
【1】 He D, Wang J, Zhang C, et al. Down-regulation of miR-675-5p contributes to tumor progression and development  by targeting pro-tumorigenic GPR55 in non-small cell lung cancer[J]. Molecular cancer, 2015, 14(1): 1.

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