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前列腺癌研究体内外模型综述

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2017年1月16日 来源:吉凯基因

摘要:

  目前,基于分子水平进行前列腺癌的研究,探索前列腺癌的发生、转移、耐药的机制,以适应更多临床个性化化诊疗需求,是当下研究的热点。想做好前列腺癌的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。且听在下慢慢道来。

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前列腺癌是发生于男性泌尿生殖系统中前列腺组织中的恶性肿瘤,是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果。前列腺癌的发病率具有明显的地理和种族差异。在欧美等发达国家和地区,发病率居男性恶性肿瘤第一位,其死亡率居各种癌症的第二位;在亚洲,其发病率低于西方国家,但近年来呈迅速上升趋势。在我国,绝大多数的患者在就诊时已经属于前列腺癌晚期,5年生存率不足美国的1/3。

95%以上的前列腺癌是发生于前列腺腺体组织的腺癌。在前列腺癌的诊断中,血清前列腺特异抗原(PSA) 在大多数有临床意义的前列腺癌中都会升高,因此是应用最广和最重要的前列腺癌早期检测指标。PSA正常值一般<4ng/mL,当前列腺癌发生时PSA>10ng/mL,具有辅助临床诊断的显著意义。目前,基于分子水平进行前列腺癌的研究,探索前列腺癌的发生、转移、耐药的机制,以适应更多临床个性化化诊疗需求,是当下研究的热点。

子曰:“工欲善其事,必先利其器。”想做好前列腺癌的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。且听在下慢慢道来。

一、我需要哪种细胞模型?是否易于操作?

俗话说,实验要想做好,细胞必不可少。细胞模型三个优点:周期短,背景干净,易出结果。引用季博的话,临床科研第一步,先找合适的细胞模型。

注意了!吃瓜群众们,先把瓜放一放。前列腺癌作为男性泌尿生殖系统的肿瘤,与雄激素密切相关。不同的癌细胞,其AR(雄激素受体)表达水平、雄激素依赖性以及雄激素应答,都各有不同。在研究中,经常会涉及基因与雄激素相关的探索,因此,细胞系的选择尤为重要。以下列出了前列腺癌常见的细胞系,以及其雄激素相关的特性。

二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?

细胞实验做完,想发高分文章?没有体内实验数据的证实怎么行!前列腺癌动物模型可以分为皮下成瘤和原位成瘤两种。皮下瘤的模型与其他肿瘤类似,但如果想做原位瘤研究,那么需要注意以下几点:a.一定一定一定要买雄鼠(别问我为什么)b. 前列腺组织很小,为了便于操作,对裸鼠的素质是有要求地(年龄6-8周,体重要在19g以上)。其他细节总结如下。

想做原位成瘤理不清实验细节的老师,请参照参考文献【9】的protocol。(内附手术视频链接,一般人我不告诉他)


 
三、体内外模型选好了,那么我的实验需要使用哪种方法对基因进行操作呢?  
 
问:把基因功能做好,一共分几步?
答:三步!选模型-基因操作-看表型。

由于细胞和动物模型的不同特点,常常导致基因操作的难易程度不一样。慢病毒*是一种非常高效的基因操作工具,不仅在细胞系中具有高效的表现,在做体内实验的时候,也会经常使用,比如原位组织注射研究基因的功能。下面我们就来看一看,如何选择合适的慢病毒载体对基因进行操作吧~

*慢病毒是一种实现高效体外体内细胞感染的工具。慢病毒能够将外源基因整合入宿主细胞的基因组,使其随细胞增殖稳定表达,并且对分裂期和非分裂期的细胞均有较高感染能力,加之其安全性高、毒性低的特点 , 慢病毒已经成为现代细胞生物学研究中一种广泛应用的基因传递工具。

启动子、荧光标记、抗性标签是我们需要考虑的三大要素。具体的选择,需要根据实验的需求进行变化。对于前列腺癌研究来说,Prostate-specific antigen (PSA)是较为常用的组织特异性启动子。下图帮大家梳理了前列腺癌中常用载体的选择方案,马上定制你的专属载体,进行表型的观察。获得高分SCI、国自然基金,走上人生巅峰,指日可待!

上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证,月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用5项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。

400名兢兢业业的吉凯人,用专业换您的高效。

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参考文献
【1】Adrie van Bokhoven et al. “Molecular Characterization of Human Prostate Carcinoma Cell Lines.” The Prostate 57(2003): 205-225

【2】Xuefeng Li et al. “TOP2Ahigh is the phenotype of recurrence and metastasis whereas TOP2Aneg cells represent cancer stem cells in prostate cancer."  Oncotarget 5 (2014): 9498–9513.

【3】Bo Yang et al. “Lentivirus-mediated SMO RNA interference inhibits SMO expression and cell proliferation, and affects the cell cycle in LNCaP and PC3 cancer cell lines.” Asian Journal of Andrology 12 (2010): 196–202

【4】Tong Liu et al. “p21-activated Kinase 6 (PAK6) Inhibits Prostate Cancer Growth via Phosphorylation of Androgen Receptor and Tumorigenic E3 Ligase Murine Double Minute-2 (Mdm2).” The Journal of Biological Chemistry 288.5 (2013): 3359-5569.

【5】Aihong Mao et al. “MicroRNA-449a enhances radiosensitivity by downregulation of c-Myc in prostate cancer cells.” Scintific Reports 6 (2016): 27346.

【6】Alexandra Hockla et al. “PRSS3/Mesotrypsin Is a Therapeutic Target for Metastatic Prostate Cancer.” Molecular Cancer Research 10.12 (2012): 1555.

【7】 Janet Pavese et al. “An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis” Journal of Visualized Experiments 79, (2013), e50873

(http://www.ebiotrade.com/)
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