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血液肿瘤研究体内外模型综述

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2017年1月20日 来源:吉凯基因

摘要:

  针对血液肿瘤的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究,获得阳性数据,发表论文,申请基金,登上人生巅峰,你有了解吗?今天就给大家聊一聊血液肿瘤研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。

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血液肿瘤主要包括各类白血病、多发性骨髓瘤以及恶性淋巴瘤。急性白血病占常见恶性肿瘤的第八位,淋巴瘤也是在前十位,并且发病率逐年升高,多发性骨髓瘤的整个发病率在血液恶性肿瘤里面占10%。

血液肿瘤发病急,在传统的放疗、化疗、骨髓移植等治疗方式下,治疗周期长、费用高昂、过程痛苦,但治愈率却并不很理想。儿童白血病是儿童发病率最高的一种恶性肿瘤,近几年临床病例数量更是在逐年上升,已成为儿童肿瘤中的头号杀手。因此,血液肿瘤的治疗研究是当务之急。针对血液肿瘤的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究,获得阳性数据,发表论文,申请基金,登上人生巅峰,你有了解吗?今天就给大家聊一聊血液肿瘤研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。

一、我需要哪种细胞模型?是否易于操作?

俗话说,实验要想做好,细胞必不可少。细胞模型有三个优点:周期短,背景干净,易出结果,所以一般都作为所有研究的第一步。下面总结了一些常用的血液肿瘤细胞的特性:


 
悬浮细胞感染小贴士

如果细胞MOI>>100,怎么办?吉凯对于难感染的悬浮细胞,也有办法:

1. 初级版:采用离心感染方法,增加病毒感染时与细胞的接触,从而提高感染效率。如将细胞培养板密封后,用平角转子离心机1000g离心15min-1h,再放回培养箱中正常培养;
2. 进阶版:使用GMP级慢病毒。尤其对于一些原代分离的细胞,可通过使用高纯度的病毒减小病毒感染对细胞的影响,从而提高感染效率。吉凯拥有国内唯一基因工程载体GMP生产车间,特殊纯化工艺保证临床级慢病毒的纯度和滴度;
3. 终极版:如果是做CAR-T的老师,还可配合使用吉凯自有专利的CAR-T细胞感染试剂盒,可保证T细胞病毒感染效率在40%-80%。

 

吉凯基因GMP级慢病毒CAR产品
Genechem®-Lenti-CAR

二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?

稳定性、重复性较好的动物模型可在肿瘤基础性研究和抗肿瘤药物筛选中发挥重要作用。血液肿瘤常用的动物模型主要有:I皮下移植瘤模型;II血液模型。皮下移植瘤模型较容易建立,易于动态观察肿瘤的生长状态。血液模型则一般以生存天数作为观察终点,用活体成像、病理切片、流式细胞术等方法检测小鼠骨髓及脏器中的肿瘤细胞生长及浸润情况。该模型与白血病患者的病理生理状况较为接近,但实验难度较大。

三、体内外模型选好了,那么我的实验需要使用哪种方法对基因进行操作呢?

由于细胞和动物模型的不同特点,常常导致基因操作的难易程度不一样。慢病毒*是一种非常高效的基因操作工具,不仅在细胞系中具有高效的表现,在做体内实验的时候,也会经常使用,比如原位组织注射研究基因的功能。下面我们就来看一看,如何选择合适的慢病毒载体对基因进行操作吧~

*慢病毒是一种实现高效体外体内细胞感染的工具。慢病毒能够将外源基因整合入宿主细胞的基因组,使其随细胞增殖稳定表达,并且对分裂期和非分裂期的细胞均有较高感染能力,加之其安全性高、毒性低的特点 , 慢病毒已经成为现代细胞生物学研究中一种广泛应用的基因传递工具。

启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同,这些元件也需要相应变化。下图帮大家梳理了常用载体的选择方案,马上定制你的专属载体,进行表型的观察。获得高分SCI、国自然基金,走上人生巅峰,指日可待!


 
上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证,月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用5项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。

400名兢兢业业的吉凯人,用专业换您的高效。

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参考文献
【1】 T Zhou et al. “Downregulation of Mcl-1 through inhibition of translation contributes to benzyl isothiocyanate induced cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia cells.” Cell Death and Disease (2013) 4, e515.
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【8】Lixian Wu, et al. “Dual Inhibition of Bcr-Abl and Hsp90 by C086 Potently Inhibits the Proliferation of Imatinib-Resistant CML Cells.” Clinical Cancer Research 2015.
【9】 Xiaobing Miao, et al. “Overexpression of TRIP6 promotes tumor proliferation and reverses cell adhesion-mediated drug resistance (CAM-DR) via regulating nuclear p27Kip1 expression in non-Hodgkin’s lymphoma.” Tumor Biology 2016, 37,  1, 1369–1378.
【10】Bihui Yang, et al. “SPAG6 silencing inhibits the growth of the malignant myeloid cell lines SKM-1 and K562 via activating p53 and caspase activation-dependent apoptosis.” International Journal of Oncology, 2014, 649-656.
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