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胰腺癌研究体内外模型综述

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2017年1月22日 来源:吉凯基因

摘要:

  针对胰腺癌的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究,获得阳性数据,发表论文,申请基金,登上人生巅峰,你有了解吗?今天就给大家聊一聊胰腺癌研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。

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    胰腺癌的预后非常差,其致死率基本等同于发病率。在美国,胰腺癌的5年生存率依然只有6%。关键的问题是胰腺癌患者在早期基本无症状,被诊断发现时大多数都处在晚期;全球每年胰腺癌致死的病人超过20万人。

    胰腺癌有多种类型,基本上划分成外分泌肿瘤和内分泌肿瘤两种。99%的胰腺癌都属于外分泌型肿瘤,其发病细胞来源于产生消化酶的胰腺细胞,该种类型有分为几种亚型。其中差不多85%为胰腺腺癌,其发源于胰腺导管,而其中的60-70%为胰头癌;另一种相对普遍的亚型是胰腺泡细胞癌,约占5%,类似内分泌类型肿瘤,常常过度产生某种特定类型的分子;囊腺癌在胰腺癌中约占1%,预后相对其他外分泌类型较好;胰胚细胞癌是比较罕见的类型,常发生于儿童;此外还有腺鳞癌、印戒细胞癌、肝样癌、胶样癌、未分化细胞癌、破骨细胞样巨细胞未分化癌。另外还有胰腺黏液性囊性肿瘤常常表现出不同的恶性程度,多数为良性。

    针对胰腺癌的研究少不了细胞和动物模型的加持。怎么选择这些工具能够帮助我们更好的进行研究,获得阳性数据,发表论文,申请基金,登上人生巅峰,你有了解吗?今天就给大家聊一聊胰腺癌研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。

一、我需要哪种细胞模型?是否易于操作?

    俗话说,实验要想做好,细胞必不可少。细胞模型有三个优点:周期短,背景干净,易出结果,所以一般都作为所有研究的第一步。到目前为止,全球科学家建立了很多胰腺癌的细胞系,其中以胰腺腺癌为主。下表对主要的一些细胞系做了一个总结:

二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?

    动物模型可在肿瘤基础性研究和抗肿瘤研究中发挥重要作用。胰腺癌研究中,增殖方向常用的体内模型为裸鼠皮下成瘤,这里就不再赘述了。实验方法可参考前一期肝癌的总结文章。

    另外,也可通过转基因动物的方式构建自发性胰腺癌模型。但转基因动物成本高、周期长,使用具有很大的局限性。今天就给大家介绍的一个厉害的:利用大热的CRISPR/Cas9技术,直接向小鼠体内原位胰腺腺管注射Cre慢病毒,有效敲除基因后导致肿瘤形成。

三、体内外模型选好了,那么我的实验需要使用哪种方法对基因进行操作呢?  

    由于细胞和动物模型的不同特点,常常导致基因操作的难易程度不一样。慢病毒*是一种非常高效的基因操作工具,不仅在细胞系中具有高效的表现,在做体内实验的时候,也会经常使用,比如原位组织注射研究基因的功能。下面我们就来看一看,如何选择合适的慢病毒载体对基因进行操作吧~

    *慢病毒是一种实现高效体外体内细胞感染的工具。慢病毒能够将外源基因整合入宿主细胞的基因组,使其随细胞增殖稳定表达,并且对分裂期和非分裂期的细胞均有较高感染能力,加之其安全性高、毒性低的特点 , 慢病毒已经成为现代细胞生物学研究中一种广泛应用的基因传递工具。
  
    启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同,这些元件也需要相应变化。对于胰腺癌研究来说,若想实现组织特异性表达,可使用Insulin1、Insulin2、pdx1等胰腺组织特异性启动子。下图帮大家梳理了胰腺癌中常用载体的选择方案,马上定制你的专属载体,进行表型的观察。获得高分SCI、国自然基金,走上人生巅峰,指日可待!

    上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证,月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用5项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。

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参考文献

【1】Li, J., et al. "Downregulated miR-506 expression facilitates pancreatic cancer progression and chemoresistance via SPHK1/Akt/NF-κB signaling." Oncogene (2016).
【2】Xu, Wei, et al. "Mutated K-ras activates CDK8 to stimulate the epithelial-to-mesenchymal transition in pancreatic cancer in part via the Wnt/β-catenin signaling pathway." Cancer letters 356.2 (2015): 613-627.
【3】Jiao, Feng, et al. "Elevated expression level of long noncoding RNA MALAT-1 facilitates cell growth, migration and invasion in pancreatic cancer." Oncology reports 32.6 (2014): 2485-2492.
【4】Zhou, J., et al. "Anti-angiogenesis by lentivirus-mediated small interfering RNA silencing of angiopoietin-2 gene in pancreatic carcinoma." Technology in cancer research & treatment 10.4 (2011): 361-369.
【5】dong Li, Hai, et al. “STAT3 knockdown reduces pancreatic cancer cell invasiveness and matrix metalloproteinase-7 expression in nude mice.” PLoS One 6.10 (2011): e25941.
【6】 Chiou, Shin-Heng, et al. "Pancreatic cancer modeling using retrograde viral vector delivery and in vivo CRISPR/Cas9-mediated somatic genome editing." Genes & development 29.14 (2015): 1576-1585.

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