Moxi GO™ II新一代个人型双荧光流式细胞分析仪

【字体: 时间:2017年10月27日 来源:基因有限公司

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  Moxi GO™ II是由美国ORFLO公司最新推出的新一代双荧光流式细胞分析仪,其体积小巧,功能强大,一次检测可以获得基于库尔特原理的金标准计数和基于荧光原理的的双荧光通道检测数据,让您不再需要进行复杂的流式细胞仪操作学习,不再承受排队之苦,操作简单,随时随地进行检测,赶快把它抱回实验室吧~

流式细胞技术给我们带来了精准又漂亮的数据,但对操作的高要求及平台仪器的排队使用,使实验汪们痛苦不堪。美国ORFLO公司最新推出的经济型的新一代流式细胞仪MoxiGO™II可以完美解决以上问题。

首先,它体积非常小巧,重量只有3.18kg,仪器内置4500mAh锂电池,便于在实验室内的移动和随意放置;内置软件程序,800X480彩色触摸屏,可清晰呈现数据结果,让您一目了然。

其次,Moxi GO™II将细胞计数的金标准--库尔特电阻抗检测技术与双通道荧光检测技术两种模式完美结合~只需在触摸屏幕上点触、滑动,即可获得包括:基于库尔特原理的细胞计数和细胞粒径,以及基于细胞单荧光或双荧光标记的细胞活性、细胞凋亡、细胞转染效率、免疫细胞、细胞内活性氧、线粒体膜电位等的检测数据。

图1:库尔特原理示意图

细胞数量、粒径的检测金标准——库尔特原理:(如图1所示)悬浮在缓冲液中的细胞随缓冲液通过小孔时,取代相同体积的缓冲液,由于细胞的导电性能和缓冲液不同,在恒定电流设计的电路中,这种情况会导致检测孔内外两电极见间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与通过细胞的大小和数目成正比。利用其专利的薄膜传感器技术对细胞进行数量、直径等的检测,获取更加精准可靠的数据。


 
图2:荧光检测的原理

细胞荧光检测的原理:(如图2所示)当对细胞大小检测的同时,以传统流式的方法利用激光器(488nm)激发标记在细胞上的1~2种特异性荧光染料,并自由选择通过1或2个特异性的PMT(525/45nm,561nm/LP)进行荧光检测,分别获取相应通道的荧光信号。

操作非常简单:(如图3所示)Moxi GO™II采用了卡槽式的微流样本芯片设计将芯片插入卡槽,上样,只需3-4步,即可获得检测结果,操作非常简便。


 
图3:Moxi GO™II的操作步骤

芯片内有细胞过滤功能,无需对细胞悬液进行滤网的过滤,直接将细胞加入膜片孔内即可,膜片的窗口处为非透明材质做成,形成小的避光暗室,避免了荧光检测过程中荧光猝灭现象(如图4所示)。


 
图4:微流控芯片结构


 
图5:Moxi GO™II触摸屏操作界面

Moxi GO™II将常用的流式实验程序内置在软件中,在实验过程中只需点击要进行的实验名称即可完成相应的数据检测,应用哪个,点哪个。无需进行复杂的操作培训,即可快速获取所需数据~

性能展示:

我们来看一下基于库尔特原理的细胞计数(如图6所示):将Moxi GO™II与台式流式细胞仪、成像细胞分析系统、血细胞计数板进行比较。结果发现,对于细胞的计数误差要低于其他类型产品,而计数平均值的变异系数(CV<5%)也是最小的,可见 Moxi GO™II对于细胞数量的检测表现优异。

图6:基于不同原理的细胞计数准确性的比较


Moxi GO™II的应用实例:

该仪器配备有双PMT,可兼容实验室常用染料,525/45nm PMT可兼容染料有:FITC, GFP, Alexa Fluor 488nm, Calcein 等,561nm/LP PMT可兼容染料有:PI, PE, DS Red, Sytox Orange, 7 AAD, Nile Red, Rhodamine Red, Sun Coast Yellow, PE/Cy5等。双PMT可同时检测,互不影响,也可选择您所需要的通道进行检测,使用灵活~

应用案例一:细胞凋亡检测


 
图7:细胞凋亡检测

在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧。在凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-V是磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。用FITC标记的 Annexin-V 作为探针可检测细胞凋亡的发生。PI能够透过凋亡中晚期的细胞和死细胞的细胞膜,使细胞核红染。因此将 Annexin-V-FITC 与 PI 配合使用,可以将凋亡早期细胞、凋亡晚期细胞、健康细胞区分开来。预置的细胞凋亡APPs可直接给出细胞分析的结果。

应用案例二:细胞转染效率评估

图8:细胞转染效率评估

该实验对HCT-15细胞系转染表达GFP的质粒后,对细胞的转染效率进行评估,10s即可得到图示结果。图8右:做转染处理的细胞与未做转染处理的细胞,两组检测数据的overlay可以在软件上自动生成。
应用案例三:PBMCs免疫细胞分型(细胞表面染色)


 
图9:PBMCs免疫细胞分型(细胞表面染色)

从人外周血分离出的PBMCs,用FITC标记的CD3抗体和用PE标记CD4抗体进行免疫染色,在Moxi GO™II上进行荧光值的分析,可快速获得不同免疫细胞亚型的比例。

应用案例四:细胞内P-ERK蛋白表达检测(ICW)


 
图10:细胞内P-ERK蛋白表达检测(ICW)

从人外周血分离出来的PBMCs细胞用激活剂进行激活,使细胞内ERK蛋白发生磷酸化。处理结束后,对细胞进行固定、透化,用PE标记的P-ERK单细胞抗体进行免疫染色。

如图9所示:彩色为激活剂处理样本。灰色:未加激活剂处理样本。

应用案例五:细胞内活性氧检测


 
图11:细胞内活性氧检测

用TBHP 诱导Jurkat细胞产生氧化应激反应,产生的活性氧会使加入的CellROX Orange染料发出荧光。因此通过检测CellROX Orange的荧光值可计算活性氧比例。当TBHP和NAC同时处理细胞时,TBHP诱导的氧化应激反应会被抗氧化剂NAC所抑制。导出的FCS3.1数据可导入到电脑版flow jo软件中进行数据分析。

应用案例六:线粒体膜电位检测

图12:线粒体膜电位检测

TMRE 是一种可以透过细胞膜的阳离子染料,容易透过带负电的线粒体膜而累积。线粒体膜电势的大小决定了TMRE的摄取量 (高的MFI =高的线粒体膜电势=健康的细胞),因此可以用细胞内TMRE的荧光值评估线粒体膜电势。如图12所示, Jurkat细胞经喜树碱处理后,其线粒体膜电势下降;t=0(gray) 、t=25hr (red/purple)。

总结:Moxi GO™ II新一代双荧光流式细胞分析仪,体积小巧,功能强大,一次检测可以获得基于库尔特原理的金标准计数和基于荧光原理的的双荧光通道检测数据,让您不再需要进行复杂的流式细胞仪操作学习,不再承受排队之苦,操作简单,随时随地进行检测,赶快把它抱回实验室吧~

欢迎索取Moxi GO II新一代双荧光流式细胞分析仪的详细资料

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