中国水产科学研究院黄海水产研究所：iTRAQ蛋白质组分析揭示受迟缓爱德华菌侵染牙鲆的免疫应激

　　

牙鲆是亚洲国家培育最广泛的海鱼之一。然而，弧菌病病毒或细菌等病原体（如Edwardsiella tarda，Streptococcus parauberis，Streptococcus iniae）感染可导致水产养殖鱼类的死亡率显著升高。迟缓爱德华菌是一种革兰氏阴性细菌，是爱德华氏病的病原体，其可以侵袭淡水和海洋鱼类，以及无脊椎动物，两栖动物，爬行动物，鸟类，哺乳动物甚至人类。

迟缓爱德华菌是一种肠杆菌，其通过粘膜途径侵入鱼的内部器官，会引起鱼类全身性出血性败血病和肺炎性腐败性疾病，肿胀皮肤损伤，以及内部器官溃疡和坏死。 迟缓爱德华菌感染导致牙鲆中肝细胞肥大和肝细胞核明显增大。因此，防止迟缓爱德华菌感染的发生是水产养殖和人类健康中的一个重要问题。

肝脏是鱼类细菌病原体攻击的重要器官。本研究利用iTRAQ蛋白质组学分析技术对响应迟缓爱德华菌侵染的牙鲆差异蛋白质组进行了分析。共鉴定到3290个蛋白质，通过鉴定和分类后这些蛋白质主要分为：生物过程（51.4％），分子功能（63.6％）和细胞成分（57.7％）。 KEGG富集分析表明，补体和凝血级联途径和矿物质吸收途径明显富集。在差异表达的蛋白质中，参与介导补体级联（例如补体成分C7，C8，C9，补体因子H，Bf / C2）和矿物质吸收（例如铁蛋白，STEAP-4）的蛋白质在感染期间显著上调。随后，通过多重反应监测（MRM）测定验证了五种显著上调（C4，C8beta，铁蛋白中间亚基，PRDX4-like和KRT18）和一种显著下调（转铁蛋白）的候选免疫蛋白。此外，利用定量实时PCR在转录水平上验证了补体级联和矿物质吸收途径中15种蛋白质的表达变化。在迟缓爱德华菌感染后，利用定量实时PCR研究了四种转录因子（p21Ras，Rab 31-like，NF-kB，STAT3）的转录水平。本研究有助于了解鱼类肝脏的防御机制。

 
Fig. KEGG pathways for association of differentially expressed proteins in the liver for the mineral absorption pathway

参考文献
Wang L, Shao C，et al. Proteome profiling reveals immune responses in Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) infected with Edwardsiella tarda by iTRAQ analysis. Fish Shellfish Immunol. 2017 Jul;66:325-333. doi: 10.1016/j.fsi.2017.05.022

本研究中iTRAQ蛋白质组学分析服务由联川生物提供

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