使用分子标签（UMT）对单个分子进行准确分析：ThruPLEX® Tag-seq Kit

通过带有特别分子标签（UMT）的引物，构建带有分子标记和样品检索引物的NGS文库。包含超过1,600万个特别序列用于在扩增前标记每条DNA片段，以检测低丰度等位基因或计数独立片段。

ThruPLEX Tag-seq Kit 基于新的ThruPLEX技术，采用带有特别分子标签（UMT）的ThruPLEX引物构建带有分子标记和样品检索引物的Illumina NGS文库。每个试剂盒包含超过1,600万个特别序列用于在扩增前标记每条DNA片段，可以在文库制备、目标富集和数据分析过程中追踪DNA片段，以检测低丰度等位基因或计数独立片段。

ThruPLEX Tag-seq采用ThruPLEX 技术设计及优化，可以1到50 ng DNA起始构建高多样性、高重复性文库。整个流程在单管或单孔中就可完成，只需3步，2小时，无需中间纯化步骤和样品转移，避免了操作误差和样品损失。ThruPLEX Tag-seq Kit 包含所需全部试剂，包括可以多重标记96个样品的检索引物。纯化和定量后，文库可以采用标准Illumina测序试剂和流程在Illumina NGS平台进行测序。同时采用Curio Genomics提供的云服务软件或开源软件进行生物信息学分析，从而快速获得研究结果。

ThruPLEX Tag-seq兼容主流平台实现强有力的目标区域富集，如Agilent SureSelect® and Roche NimbleGen SeqCap® EZ。

图1： ThruPLEX Tag-seq技术流程

 
图2：使用本kit 对30 ng 1% Horizon cfDNA standard，采用 ThruPLEX Tag-seq构建文库。Agilent SureSelect富集目标区域，~5,000X覆盖度测序，采用Curio Genomics生物信息学平台分析数据。采用原始数据分析，EGFR 的突变（黄色点）会被背景误差遮盖（左图）。而在数据分析过程中使用UMT修正误差，突变更容易识别（右图）。

图3：使用本kit 对30 ng（A）或10 ng Horizon cfDNA standard采用ThruPLEX Tag-seq构建文库，240 KB定制panel（NimbleGen SeqCapEZ）富集目标区域，HiSeq 2500 ~5,000X覆盖度测序。Curio Genomics生物信息学分析平台进行数据分析。

*数据来源于Takara Bio Inc.