从干细胞到肿瘤模型的关键蛋白质

西班牙国家癌症研究中心（CNIO）的一组研究团队开发了一个具有生产能力的尤文肉瘤（Ewing sarcoma）细胞模型。基于本篇《Stem Cell Report》文中提到的CRISPR技术，其他研究机构可以参考该细胞模型，进行疾病起源、进程的机理分析，并寻找治疗方法。

　　

生物通报道：CRISPR，著名的基因组编辑技术。它不仅可以用于疾病治疗，还能用来制备疾病发生和发展的细胞模型。这些模型是病理学研究的基础，也是开发新诊断法和新疗法的重要手段。近日，《Stem Cell Report》报道了一项重要的模型开发成果——在成人细胞和人类干细胞内创建尤文肉瘤。

“我们的想法是构建一个尽可能准确的肿瘤发生系统模型，”项目带头人Sandra Rodríguez Perales说。

尤文肉瘤的发病机理是11号和12号染色体之间发生易位，导致两个基因融合，形成一个新的癌基因。它是儿童和青少年最常见的恶性原发骨肿瘤。

当作者诱导基因融合时，他们发现CRISPR诱导人类干细胞基因融合的效率较低，而其他方法又很难在人类干细胞上开展。“我们用其他细胞系工作时，一切都很顺利，但当我们把相同的技术应用到干细胞时，我们遇到了很多问题。”文章作者Raúl Torres Ruiz解释道。

为了提高效果，改进技术，他们比较了三种能产生这种易位的策略，其中CRISPR可能是最有效果的。经过多次实验，他们发现使用实验室自己生产的sgRNA-cas9核糖核蛋白复合物，结合DNA "主食（staple）"（一种DNA短序列，可使两个染色体末端连接），能促进易位。这种组合使实验成功率提高了7倍以上。根据作者的说法，这是一种“诱导定向易位的有力工具”。

所有改进实验，皆在“诱导多能干细胞（iPSCs）”上获得实现。这不仅代表着一个尤文肉瘤细胞模型，还指示着其他近似疾病模型的构建方法。

这一策略将有利于从人类干细胞到肿瘤模型的精确基因组编辑，将加快很多疾病的机理研究。

原文标题：Efficient Recreation of t(11;22) EWSR1-FLI1+ in Human Stem Cells Using CRISPR/Cas9