检测蛋白表达能有多快?10分钟出结果![新品推荐]

【字体: 时间:2018年10月24日 来源:生物通

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  赛默飞世尔科技最新推出的Pro-Detect™快速检测试纸仅需10-15分钟,即可验证蛋白是否表达,在表达和纯化流程的关键环节随时使用,让您从此不再惴惴不安,而是对实验结果胸有成竹。

在蛋白表达的漫长过程中,我们总是怀着忐忑不安的心情。特别是在表达全新蛋白或改变实验体系后,这种紧张的感觉更加明显。蛋白质看不见摸不着,不到最后,我们都无法获知表达结果。在此过程中,除了转发锦鲤,似乎什么也做不了。

然而,从转化/转染到表达再到检测,大体需要好几天的时间。若等到整个流程结束后再检测蛋白是否表达,万一结果不理想,那的确有点浪费时间。左一个三天,右一个五天,一晃整个月就过去了。如果有一种产品能够快速测定蛋白表达,那该多好。

如今,这种产品真的上市了。赛默飞世尔科技最新推出的Pro-Detect™快速检测试纸仅需10-15分钟,即可验证蛋白是否表达,在表达和纯化流程的关键环节随时使用,让您从此不再惴惴不安,而是对实验结果胸有成竹。

Pro-Detect快速检测试纸是基于侧向层析法,采用金偶联捕获抗体来检测目标蛋白。使用方法相当简单。您只需稀释蛋白样品,浸入试纸10到15分钟,即可根据检测线和对照线来判断结果,无需任何特殊仪器。

与动辄耗费半天或一天的凝胶电泳及western blot相比,Pro-Detect的检测时间大大缩短。不过,检测结果却与western blot和ELISA相当(图1)。它能以细胞培养基、裂解液或纯化蛋白为起始材料,对低至 ng/ml 水平的蛋白或抗体进行检测。即使溶液中存在一些常见浓度的去垢剂或盐离子,比如SDS和EDTA,结果也不受影响。实验还表明,它不会与其他靶标发生交叉反应。

图1:GST 蛋白检测: Pro-Detect 快速 GST 检测试纸与基于考马斯染料 R-250 b的蛋白染色方法及基于化学发光的免疫印迹检测比较。

既然快速又准确,那么我们不妨将Pro-Detect快速检测试纸应用在蛋白表达和纯化流程的关键环节,以便摸索蛋白表达的最佳条件。此外,Pro-Detect系列还有进行抗体分型的试纸。

蛋白表达

在蛋白表达和纯化的过程中,人们一般是在表达完成或纯化完成才检测蛋白,毕竟western blot和跑胶都那么繁琐,也不能马上获知结果。这样做就有一个风险,如果不幸表达失败,我们就浪费了3到6天的时间,拖延了实验的进程。对于抢着出成果发文章的实验室而言,这个代价可不小。

现在有了Pro-Detect快速检测试纸,我们就可以实时监测蛋白表达和纯化的各个阶段。比如,在诱导前进行快速检测,确认无内源性表达;或在诱导后进行监测,确定目标蛋白已开始表达;在纯化阶段,我们还可以快速检测洗脱液,并收集含有目标蛋白的洗脱产物。

即使蛋白表达的结果不理想,在试纸上看不到任何阳性条带,那么我们至少能及时止损,分析原因,优化条件,下次再战,从而避免不必要的时间和成本损失。

目前,赛默飞提供14种标签蛋白的检测试纸,包括DYKDDDK(FLAG)-His双标签、SUMO、GST、MBP、Human Fc、Rabbit Fc、Mouse Fc、His、DYKDDDK (FLAG)、HA、Streptag II、AVI、Myc和V5。只要您的蛋白含有上述标签,即可使用相应的试纸。

抗体分型

此外,针对 抗体研发和生产流程中的分型检测,赛默飞还提供Pro-Detect抗体分型检测试纸,能够快速鉴定免疫球蛋白的类别、亚类以及单克隆抗体的轻链。与繁琐费时的ELISA检测(4-24小时)相比,检测难度大大减小,只需10分钟即可看结果。

除了小鼠和大鼠的抗体分型产品,赛默飞还独家提供人源抗体的分型检测产品。每份试纸都覆盖了多种检测指标,帮助您轻松实现各种抗体亚型和轻重链的快速鉴定。

小鼠

大鼠

IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, IgM, κ轻链和λ轻链

IgG1, IgG2a, IgG2b IgG2c

IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, κ轻链和λ轻链

使用方法

您的样本可以是细胞培养基、裂解液或纯化的蛋白。首先,您需要用试剂盒中提供的Pro-Detect稀释缓冲液来稀释样本。然后,取适量样本加入检测管或96孔板。

之后,将Pro-Detect快速检测试纸浸入稀释的样本中,孵育10-15分钟。

最后观察结果,就是这么简单。

您瞧,1条试纸,10分钟,就能够让您对蛋白表达和纯化流程充满信心,避免在整个流程结束后才追悔莫及。如果其中的某个环节不慎出错,那么这条试纸至少能避免您一错再错。试纸虽小,作用可大呢。

不过还要提醒一下,这是一种快速的定性检测,而非定量检测,如果您需要判断目的蛋白有多少,建议在表达和纯化流程结束后,通过western blot等传统实验手段进一步分析。最后提一句,听说这种试纸有新品尝鲜活动,欢迎联系赛默飞了解一下。(生物通 余亮)

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