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简单快速低成本的细胞氧消耗和脂肪酸分析方法

-- LUXCEL细胞氧消耗分析试剂盒(MitoXpress® Xtra Oxygen Consumption Assay)

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2018年2月2日 来源:基因有限公司

摘要:

  Luxcel Biosciences的MitoXpressXtra细胞氧消耗分析试剂盒可以通过实时监测来对细胞整体、分离出来的线粒体或者3D培养体系氧气消耗率进行检测。该技术不仅可通过检测呼吸速率来分析细胞代谢特质,也可以用于高通量检测药物对于线粒体的毒性。

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细胞代谢与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病、肥胖、糖尿病及干细胞等多个领域息息相关。能量代谢指标如细胞耗氧率(OCR)和胞外酸化率(ECAR)可帮助研究人员更多地了解细胞对外界的应激反应和运作机制。但以往细胞代谢的检测技术存在较多限制,例如难以对细胞代谢进行连续、实时的检测;一些专门检测细胞代谢的仪器、硬件贵,试剂耗材消耗成本高,实验重复性低且只能检测有限指标。如何解决这个矛盾?Luxcel Biosciences的细胞氧消耗分析试剂盒应运而生。

细胞氧消耗分析试剂盒(MitoXpress® Xtra Oxygen Consumption Assay)

Luxcel Biosciences的MitoXpress Xtra细胞氧消耗分析试剂盒可以通过实时监测来对细胞整体、分离出来的线粒体或者3D培养体系氧气消耗率进行检测。该技术不仅可通过检测呼吸速率来分析细胞代谢特质,也可以用于高通量检测药物对于线粒体的毒性。

该试剂盒基于专利的氧原子荧光探针(MitoXpress® Xtra)对氧气含量进行评估。氧气分子与探针接触可以使其荧光淬灭,因此体系中的氧气浓度与荧光信号成反比。氧气消耗率可以通过一段时间内荧光信号的变化计算出来。由于探针与氧原子的结合是一个可逆反应(无论是探针还是氧气分子都不会被消耗),不会对细胞或者线粒体造成任何损伤,因此是用于长时间连续实时检测细胞耗氧率的理想产品。

MitoXpress® Xtra技术可以:

▪ 应用于不同的体外模型,包括贴壁和悬浮细胞、透性化细胞、分离的线粒体和酶、组织、3D培养和细胞微球、细菌、酵母和霉菌。
▪ 简单的“mix-and-measure”操作步骤,可同时与其他试剂盒如pHXtra糖酵解检测试剂盒一起使用进行多参数检测,实现细胞代谢表型鉴定。
▪ 检测原理是一个可逆反应,实现对快速变化的细胞耗氧进行连续,实时地监测。
▪ 通过结合其他试剂盒的使用,如MitoXpress FAO脂肪酸氧化分析试剂盒,对细胞的代谢表型进行更深入的分析。

Luxcel Biosciences的试剂盒最大的优势之一就是无需另外购置特殊的仪器,只需要一台多功能酶标仪即可进行检测,大大节省了实验室开销。

应用例子:

1. 细胞氧气消耗率(OCR)的分析:

Figure 1: 利用MitoXpress® Xtra对不同类型的线粒体功能调控药物处理细胞的耗氧速率进行检测。细胞呼吸(Untreated)使细胞外氧气浓度下降,MitoXpress® Xtra探针信号增强,信号变化速率反映了细胞呼吸速率。电子传递链抑制剂抗霉素A(Antimycin A)使细胞呼吸速率下降,而解偶联剂(FCCP)则对细胞的呼吸速率有最大程度地提升。

2.药物浓度与细胞耗氧率的量效关系

Figure 2: 从抗霉素A浓度与细胞氧气消耗速率的量效关系曲线可以看出,抗霉素A的浓度越大,细胞耗氧速率越低。

其他相关试剂盒:

MitoXpress® FAO Assay脂肪酸氧化试剂盒
该试剂盒需要与细胞外氧消耗分析试剂盒搭配使用。试剂盒提供了一系列的调节剂帮助使用者研究脂肪酸氧化反应所诱导的细胞呼吸。试剂盒成分包括:

L-carnitine(左旋肉毒碱):把脂肪酸从细胞质运送到线粒体内,并对乙酰辅酶A有稳定作用,促使脂肪酸的能量代谢;
Etomoxir(乙莫克舍):脂肪酸氧化抑制剂;
FCCP:解偶联剂,可破坏线粒体内膜,导致氧耗增加,从而促进脂肪酸氧化反应。

其他相关试剂盒:

细胞糖酵解分析试剂盒(pH-Xtra™ Glycolysis Assay)
细胞应急反应试剂盒(pH-Xtra™ Stress Test)

了解详请和其他细胞代谢相关指标检测试剂盒资料,请点击索取>>

(http://www.ebiotrade.com/)
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