关于过滤,这四点你必须要清楚[心得点评]

【字体: 时间:2018年06月15日 来源:生物通

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  如今,生物学领域的过滤已经进化到更高阶,人们利用各种膜材料和孔结构来进行澄清和除菌。不过关于过滤,相信你还有一些不太清楚的地方,且听默克公司专家Robin Clark的介绍。

过滤这种技术由来已久。古代人已懂得用过滤法来净化饮用水。他们通过稻草和砂石等过滤材料,过滤掉水中的杂质,使之澄清。如今,生物学领域的过滤已经进化到更高阶,人们利用各种膜材料和孔结构来进行澄清和除菌。不过关于过滤,相信你还有一些不太清楚的地方,且听默克公司专家Robin Clark的介绍。

为什么要用这种膜过滤器?

你有没有想过为什么要使用手中的这种膜过滤器,还是说实验室有就顺手用了。至于它的材质、孔径和流速等,通通不清楚,这就有点尴尬了。其实,过滤产品的选择有很多,你看那厚厚的产品目录就知道了。如果你使用的滤膜不适合,那么也许会带来污染或其他问题。

各种常用膜的扫描电镜图像。从左到右:尼龙膜、混合纤维素(MCE)滤膜、聚醚砜(PES)膜、聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。

这些滤膜有什么不同?快速了解一下

使用尼龙膜的过滤器仍然很有用,因为它适用于一般样品的制备和过滤。不过,对于各种溶液的除菌过滤,各大厂家已经采用更新的材质来生产滤膜,因为它们经过优化,性能更佳。选购时须注意以下几方面:

▪ 低蛋白结合——确保必要的培养基成本不会因过滤而意外去除
▪ 高流速——尽量缩短无菌培养基的暴露时间,并加快日常过滤进度
▪ 低溶出物——确保从滤膜或设备本身溶出的化学物质尽可能少

在需要高流速来过滤大量体积时,聚醚砜(PES)膜是理想选择,并且蛋白结合低。若你有特别严格的要求,希望培养基或缓冲液中蛋白的浓度不受过滤影响,则PVDF膜是最佳选择,因为它表现出极低的蛋白结合。

滤膜孔径有什么影响?

实验室的过滤装置上可能标有0.1 µm、0.22 µm或0.45 µm等规格。这些孔径额定值将决定过滤器的流速,以及哪种大小的颗粒可以穿过过滤器。下面这张图综合考虑了大分子、普通颗粒和微生物。

利用不同孔径的过滤器,人们可以排除颗粒物让溶液澄清,也可以防止细菌、真菌或其他微生物污染。在必要的时候,甚至可以将两个不同的过滤器叠加,同时进行澄清或去除污染,这具体要看生产商的说明。下面是通用的选择指南:

▪ 0.45 µm孔径:这种孔径适用于溶液澄清。
▪ 0.22 µm孔径:这种孔径能够去除大多数微生物污染,但不包括支原体。
▪ 0.1 µm孔径:这种孔径能够去除支原体及其他小的微生物,但流速更慢,所以不适合常规应用。

过滤器设计如何帮你省钱省力?

坦白地说,细胞培养所需的基础培养基、血清、添加剂等成分都不便宜。如果只是因为过滤过程中的意外,就要丢弃新鲜配制的培养基,相信大家都不甘心。况且,清理超净台中溢出的培养基,可能需要几个小时。为此,默克的科学家对除菌过滤的装置进行了优化,在增加稳定性的同时可最大限度意外发生。

这些除菌过滤装置的特点包括底座稳定性增加,且高度降低,以免超出超净台的高度,不好操作。瓶盖的精确加工和关闭指示器可以避免无菌溶液的污染。螺纹和真空口的人体工程学设计可最大限度减少溢出。同时,这些装置也很方便做标记。

希望这些关于滤膜和过滤装置的小知识能够帮助你选到最合适的产品,从此无忧开展过滤操作。

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