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Takara新品推荐,细胞外囊泡(EVs)高效分离!

【字体: 时间:2020年06月12日 来源:Takara

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  为了加快细胞外囊泡(EVs)的研究进程,Takara公司推出了Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit系列产品,可以在30 min内快速分离高纯度的EVs,为EVs研究提供了高效的解决方案。

细胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs),例如细胞微粒、外泌体等,虽然体积很小,但在正常的生理过程(如免疫应答、神经元功能和干细胞维持)和疾病(如癌症和肝病)的发生发展中发挥着重要作用。EVs研究的一个关键技术瓶颈就是囊泡的分离,传统的做法是通过超速离心法实现的,但它耗时长,需要特殊的仪器,而且在高速离心的过程中可能会损伤囊泡,收量也很低。

2019年底,Takara公司推出了Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Mini)(Code No. 635741),使用普通的台式离心机操作,即可在30 min内实现EVs的快速分离,但是却无法满足客户大量提取的需求。日前,我们成功研发出了Maxi版本产品,除了上样量由850 µl(Mini)明显增加至24 ml(Maxi)外,EVs最高收量也由1010(Mini)提升至1011(Maxi)。此外,试剂盒中配备100-kDa MWCO过滤装置,可以有效去除非特异性蛋白质聚集物、脂蛋白、细胞因子等,为获得高纯度的EVs提供了高效的解决方案。

产品优势

▪ 适用范围广— 可应用于全血、血浆、血清、唾液、尿液、脑脊液、母乳、细胞培养上清液等多种生物体液样品中的EVs提取
▪ 快速、重复性好— 30 min内即可从最高850 μl(Mini)或24 ml(Maxi)生物体液样品中快速提取EVs,不同操作者也可获得具有重复性的EVs收量
▪ 收量高— EVs最高收量可达1010(Mini)或1011(Maxi),可获得足够的exosomal RNA应用于下游的RT-qPCR、 NGS等研究
▪ 纯度高— 提取的EVs经Western Blot检测表达exosome蛋白质,而不表达nonexosomal污染蛋白质,如calnexin和 albumin
▪ 完整性好— 基于凝集素的提取原理,EVs不易被破坏,TEM下观察呈经典形态
▪ 简单易用— 试剂盒组分配备齐全,包含一次性的预清洁柱,一次性的离心柱,以及平衡、洗涤和洗脱缓冲液,且经过优化,操作简便

Capturem™ EV Kit快速操作流程

基于凝集素的提取原理,EVs保持良好的完整性

▪ EVs的表面富含碳水化合物和糖基化蛋白质
▪ 基于凝集素的试验已被证明能够用于捕获EVs来进行糖工学分析
▪ Capturem EV提取试剂盒使用固定化的基于凝集素的化合物来分离EVs

Image adapted from Figure 1, Williams, C., et al., Glycosylation of extracellular vesicles: current knowledge, tools and clinical perspectives. J Extracell Vesicles 7, 1442985 (2018).

使用Capturem™ EV Kit分别从血浆、细胞培养上清液和尿液中提取EVs并进行TEM和免疫电镜观察,结果显示EVs表现出经典形态,其大小和形状与用超速离心法提取的EVs一致,且免疫金标记结果显示CD63表达呈阳性。

与超速离心法相比,可获得更高的RNA收量

使用Capturem EV kit(Mini)从50 μl血浆中提取的EVs可以获得约100 pg/μl的RNA,而使用超速离心法,至少需要300 μl血浆才能获得同样收量的RNA。而使用Capturem EV kit(Maxi)从大量样本中提取的EVs,也可以获得稳定的RNA收量。



产品列表

Code No.

产品名称

包装量

635741

Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Mini)

20 Minipreps

635748

Capturem™ Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi)

8 Maxipreps

更多详情请点击:
Takara Bio中国官网

高效分离细胞外囊泡,你需要这个解决方案>>

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