Takara GoStix Plus人细胞因子定量试剂,有颜值有内涵!

【字体: 时间:2021年12月03日 来源:Takara

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  GoStix Plus检测方法结合使用了侧向层析检测技术和附带的智能手机应用程序,能够从细胞培养上清或血清样品中快速定量人类细胞因子。

人细胞因子检测只需要10分钟?!
是的,您没有看错,只需要10分钟。

细胞因子定量通常是阐明免疫过程或评估免疫细胞表型的重要步骤。虽然ELISA是测定细胞因子的一种可靠方法,但这些方法通常需要花费数小时才能完成,无法进行实时分析。相比之下,GoStix Plus检测能够在约10分钟内对细胞因子进行定量测定,可在短时间内提供与ELISA检测相当的再现性。

GoStix Plus检测方法结合使用了侧向层析检测技术和附带的智能手机应用程序,能够从细胞培养上清或血清样品中快速定量人类细胞因子。GoStix Plus使用简单:将20 μl样品和80 μl chase缓冲液添加至GoStix检测板,等待10分钟,检测板上的检测条带和对照条带显现后,使用GoStix Plus手机应用程序扫描检测板以对样品中的细胞因子进行定量。GoStix Plus检测的批间变异(%CV)通常<15%。GoStix Plus智能手机应用程序,在iOS和Android设备上都能运行。

GoStix Plus应用于CAR-T疗法研究

对T细胞活化的基础研究有助于阐明一些相关生物学现象,比如免疫反应的启动、胸腺细胞的发育、T细胞衰竭、细胞信号和记忆细胞的形成等。这一不断增长的知识体系被应用于开发过继性细胞疗法,利用具有生物活性的T细胞治疗各种恶性肿瘤和感染,推动了T细胞体外生长和操纵方法的重大进展。

在已经展示出前景的各种不同免疫细胞疗法中,嵌合抗原受体(CAR)T细胞已经为某些癌症提供持久性应答(Reddy et al. 2020)。在CAR-T疗法中,T细胞的活化状态可以影响T细胞的生长和扩增、工程受体的表达和抗肿瘤反应的持续时间。

目前已经开发出多种T细胞活化方法,而在开发T细胞活化方法的过程中,一个共同的实验目标是对不同的T细胞亚型进行分析,以评估各种活化方法的影响和T细胞反应的程度。这些分析通常通过ELISA和微珠或玻璃阵列这样的免疫检测方法测定分泌的细胞因子来进行,但这些方法较为耗费时间、成本和人力。下图展示了几种常用的细胞因子测定方法所需要花费的时限。在这些常用方法中,GoStix-Plus分析方法的优势在于,大大缩短检测时限,可以在大约10分钟内定量测定人细胞因子干扰素-γ(IFN-γ), 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-2(IL-2)。

通过阴性选择的方式从外周血单个核细胞(PBMCs)中分离人原代T细胞,培养在RPMI+10%FCS培养基中,然后按照相应的操作指导使用抗CD3/CD28包被珠或抗CD3/CD28四聚体复合物,或使用浓度为10 μg/ml的植物血凝素(PHA)进行活化。选取几个连续的时间点对T细胞培养物进行成像处理并采集细胞培养上清液,使用GoStix Plus和重要制造商的ELISA试剂盒分别测定人细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2。

测定结果表明,使用GoStix Plus 花费10分钟测定的IFN-γ、TNF-α、IL-2产生的细胞因子谱,与使用相应ELISA方法获得的结果相当,所揭示的不同T细胞活化方法之间的差异是相同的,但花费的时间却非常短。

作为一种比传统ELISA更快、更简单的替代方法,GoStix Plus分析方法能够实时确定其培养物的状态,并筛选出需要通过更为耗费成本和花费更长时间的方法(例如,功能分析,流式微球分析)做进一步界定和分析的样品,从而节约研究人员的研究资源。此外,由于GoStix Plus分析是单次检测的形式,所以也不需要像多孔ELISA那样等待收集一定数量的样品才能进行并行检测,研究人员可以不受拘束地分析他们获得的样品,从而加快研究进度。

产品名称

Code No.

包装量

概要

IL-2 GoStix Plus

631283/631284

20 Tests/50 Tests

测定人白介素2

IFN-gamma GoStix Plus

631285/631286

20 Tests/50 Tests

测定人干扰素-γ

TNF-alpha GoStix Plus

631287/631288

20 Tests/50 Tests

测定人肿瘤坏死因子-α

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