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为阐明胶质瘤免疫逃逸机制，研究人员围绕 LINC01018/miR-182-5p/Rab27B 轴展开研究。发现该轴通过调节胶质瘤细胞外泌体（EVs）中 PD-L1 转运，诱导 M2 型巨噬细胞极化，抑制 CD8?T 细胞功能。研究为胶质瘤免疫治疗提供新靶点。
论文解读
研究背景与意义
胶质瘤是一种恶性脑肿瘤，患者预后极差，尤其是高级别胶质瘤患者的中位总生存期仅 15 个月。当前治疗手段受限于肿瘤免疫逃逸和复杂的微环境，其中大量浸润的胶质瘤相关小胶质细胞 / 巨噬细胞（GAMs）通过营造免疫抑制微环境加速肿瘤进展。PD-1/PD-L1 通路是肿瘤免疫逃逸的关键机制，但其在胶质瘤中的调控网络尚未完全明晰。长链非编码 RNA（lncRNA）LINC01018 和微小 RNA（miRNA）miR-182-5p 已被证实与胶质瘤细胞增殖相关，而 Rab27B 作为小 GTP 酶家族成员，可能通过调控细胞外泌体（EVs）运输参与免疫逃逸。在此背景下，广州医科大学附属肿瘤医院（广州癌症研究中心）的研究团队开展了相关研究，旨在揭示 LINC01018/miR-182-5p/Rab27B 轴在 PD-L1 介导的 CD8?T 细胞抑制中的作用，为胶质瘤免疫治疗提供新方向。该研究成果发表在《Biology Direct》。
主要研究方法
研究采用 78 例胶质母细胞瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常组织，通过实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）、蛋白质免疫印迹（Western blot）检测 LINC01018、miR-182-5p 和 Rab27B 的表达。利用流式细胞术分析肿瘤浸润免疫细胞（CD8?T 细胞、巨噬细胞等）的比例及功能（TIM-3、IFN-γ 表达）。通过 Transwell 实验检测胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力，并利用双荧光素酶报告基因实验验证 miR-182-5p 与 Rab27B 的靶向关系。分离胶质瘤细胞来源的 EVs，通过免疫共沉淀（Co-IP）分析 Rab27B 与 PD-L1 的结合，借助透射电子显微镜（TEM）和纳米颗粒跟踪分析（NTA）鉴定 EVs 特征。构建裸鼠皮下移植瘤模型和 C57BL/6 小鼠原位脑肿瘤模型，评估 LINC01018/miR-182-5p/Rab27B 轴对肿瘤生长和免疫微环境的影响。
研究结果
Rab27B 在胶质瘤中低表达且与免疫细胞浸润相关
通过临床样本分析发现，胶质母细胞瘤组织中 Rab27B 和 LINC01018 表达显著下调，miR-182-5p 表达上调，且 Rab27B 与 miR-182-5p 呈负相关，与 LINC01018 呈正相关。低 Rab27B 表达的肿瘤组织中，巨噬细胞和单核细胞浸润比例显著升高，CD8?T 细胞数量无明显变化，但功能受抑（TIM-3?CD8?T 细胞比例升高，IFN-γ?CD8?T 细胞比例降低），PD-L1 表达上调。
LINC01018/miR-182-5p/Rab27B 轴调控胶质瘤细胞恶性表型
双荧光素酶报告实验证实 miR-182-5p 直接靶向 Rab27B。过表达 LINC01018 可上调 Rab27B，抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭，而敲低 Rab27B 可逆转这一效应，伴随上皮 - 间质转化（EMT）标志物 E-cadherin 减少，N-cadherin 和 Vimentin 增加。裸鼠皮下移植瘤模型显示，LINC01018 过表达显著抑制肿瘤生长，下调 miR-182-5p 并上调 Rab27B。
Rab27B 通过 EVs 调控 PD-L1 转运
胶质瘤细胞来源的 EVs 中，Rab27B 与 PD-L1 结合，敲低 Rab27B 可增加 EVs 中 PD-L1 含量，且不影响 EVs 释放量。EVs 与小胶质细胞共培养实验表明，低 Rab27B 的 EVs 可诱导小胶质细胞 PD-L1 表达升高和 M2 极化（CD206?细胞比例增加）。Cre-LoxP 系统证实 EVs cargo 可被小胶质细胞摄取。
体内实验验证免疫逃逸机制
在 C57BL/6 小鼠原位脑肿瘤模型中，抑制 miR-182-5p 可上调 Rab27B，增强抗 PD-L1 治疗效果，延长小鼠生存期，减少肿瘤内巨噬细胞和 M2 型肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）浸润。而注射 EVs 可逆转这一效应，恢复 PD-L1 表达并抑制 CD8?T 细胞功能。
研究结论与讨论
本研究揭示了 LINC01018/miR-182-5p/Rab27B 轴在胶质瘤免疫逃逸中的关键作用：LINC01018 通过海绵吸附 miR-182-5p，解除其对 Rab27B 的抑制，进而减少 EVs 中 PD-L1 的装载，抑制小胶质细胞 M2 极化和 CD8?T 细胞功能抑制。反之，低表达 LINC01018 或高表达 miR-182-5p 会降低 Rab27B 水平，使更多 PD-L1 通过 EVs 传递至小胶质细胞，加剧免疫抑制微环境。该研究首次明确了 Rab27B 在胶质瘤 EVs-PD-L1 轴中的调控作用，为靶向 PD-L1 免疫治疗联合 lncRNA/miRNA 干预提供了实验依据，有望突破当前胶质瘤免疫治疗的耐药困境。尽管研究未完全解析其他免疫细胞的作用及 LINC01018 的种属差异问题，但其发现为开发基于 EVs 的生物标志物和新型治疗策略奠定了基础。
