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为探讨膀胱癌（BCa）化疗敏感性低的问题，研究人员聚焦 SRSF1 展开研究。发现 SRSF1 通过选择性剪接（AS）调控 HIF1A/BNIP3 / 线粒体自噬（mitophagy）轴，促进 BCa 进展及顺铂耐药，为 BCa 诊疗提供新方向。
膀胱癌是全球第九大常见恶性肿瘤，严重威胁人类健康。目前，以顺铂为基础的化疗是晚期膀胱癌的重要治疗手段，但总体响应率仅 30-40%，顺铂耐药问题亟待解决。与此同时，肿瘤细胞的异常生存机制如线粒体自噬（mitophagy），以及 RNA 选择性剪接（alternative splicing, AS）在肿瘤进展中的作用逐渐受到关注。然而，丝氨酸 / 精氨酸丰富剪接因子 1（SRSF1）作为首个被鉴定的原癌基因剪接因子，其在膀胱癌中的具体功能及与顺铂耐药的关联尚不清楚。在此背景下，南京医科大学第一附属医院的研究团队开展了相关研究，旨在揭示 SRSF1 在膀胱癌中的作用机制，为克服顺铂耐药提供新策略。该研究成果发表在《Journal of Translational Medicine》。
研究人员首先通过临床样本（36 对膀胱癌及癌旁组织）和细胞系（7 种膀胱癌细胞系及正常尿路上皮细胞系 SV-HUC-1），利用实时定量 PCR（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blotting）证实 SRSF1 在膀胱癌中高表达，且与患者预后不良、病理分级及肿瘤分期正相关。随后，通过体外增殖实验（CCK-8、克隆形成、EdU）、迁移实验（划痕愈合、Transwell）、IC50 测定及裸鼠成瘤实验，发现 SRSF1 促进膀胱癌细胞增殖、迁移并增强顺铂耐药性。
为探究机制，研究人员进行 RNA 测序，发现 SRSF1 敲低后线粒体自噬通路显著富集。通过线粒体膜电位（MMP）检测（JC-1 染色）、透射电镜（TEM）观察自噬体、荧光成像分析自噬流等实验，证实 SRSF1 通过调控线粒体自噬促进膀胱癌进展。进一步研究发现，SRSF1 通过 RNA 免疫沉淀（RIP）和 CUT & RUN 实验证实与缺氧诱导因子 1α（HIF1A）前体 mRNA 结合，通过其 RRM1/RRM2 结构域促进 HIF1A 的选择性剪接，生成全长 HIF1A（HIF1A-fl），进而通过双荧光素酶报告基因实验验证 HIF1A 与 BNIP3 启动子结合，激活 BNIP3 表达，最终通过泛素非依赖的线粒体自噬通路促进肿瘤细胞存活。
研究结果表明，SRSF1 在膀胱癌组织和细胞系中高表达，与不良预后相关。功能实验显示，SRSF1 敲低抑制膀胱癌细胞体外增殖、迁移，降低顺铂 IC50 值，体内抑制裸鼠肿瘤生长并增强顺铂疗效。机制上，SRSF1 通过选择性剪接调控 HIF1A/BNIP3 / 线粒体自噬轴，其中 HIF1A 外显子 14 的跳跃剪接生成截短型异构体，而全长 HIF1A 通过结合 BNIP3 启动子上调其表达，促进线粒体自噬。 Rescue 实验证实，敲低 BNIP3 可逆转 SRSF1 过表达诱导的顺铂耐药及线粒体自噬激活。
该研究首次揭示 SRSF1 通过 HIF1A/BNIP3 / 线粒体自噬轴调控膀胱癌顺铂耐药的分子机制，为膀胱癌的诊断和治疗提供了新的生物标志物和潜在治疗靶点。靶向 SRSF1 或阻断线粒体自噬可能成为增强膀胱癌化疗敏感性的新策略，具有重要的临床转化意义。研究中采用的多组学整合分析（RNA 测序、通路富集）、分子互作验证（RIP、CUT & RUN、双荧光素酶报告基因）及体内外功能验证体系，为肿瘤耐药机制研究提供了方法学参考。
