靶向TIM-3的PBD二聚体抗体偶联药物KK2845：急性髓系白血病治疗的新突破

为解决急性髓系白血病（AML）高复发率和现有疗法对白血病干细胞（LSCs）清除不足的难题，研究人员开发了靶向TIM-3的抗体偶联药物（ADC）KK2845。该药物由非岩藻糖基化全人源抗TIM-3 IgG1抗体、缬氨酸-丙氨酸连接子和强效PBD二聚体SG3199组成，在体外和体内实验中展现出对AML细胞的高效杀伤力，且对正常造血干细胞（HSCs）毒性较低。研究证实KK2845通过DNA交联和抗体依赖性细胞毒性（ADCC）双重机制发挥作用，其疗效与临床阶段CD33-ADC相当，但安全性更优。这一成果为AML患者提供了潜在的新型治疗选择，相关研究发表于《Leukemia》。

　　

急性髓系白血病（AML）是一种起源于白血病干细胞（LSCs）的恶性血液肿瘤，尽管标准化疗可诱导大部分患者达到完全缓解，但复发率高达70%，5年生存率仅30%。复发根源在于LSCs对化疗的耐药性，而现有靶向药物如CD33-ADC虽有效却因严重骨髓抑制导致治疗失败。TIM-3（T-cell immunoglobulin mucin-3）作为LSCs和AML母细胞的表面标志物，在正常造血干细胞中不表达，成为理想靶点。

为解决这一难题，Kyowa Kirin公司的研究团队开发了新型抗体偶联药物KK2845。该药物由全人源抗TIM-3 IgG1抗体、可被溶酶体组织蛋白酶切割的缬氨酸-丙氨酸（Val-Ala）连接子，以及强效DNA交联剂PBD二聚体SG3199组成。SG3199能长效作用于静止期细胞，而IgG1抗体骨架可增强抗体依赖性细胞毒性（ADCC），实现对LSCs的双重打击。

研究采用表面等离子共振（SPR）分析结合活性，共聚焦显微镜观察内化过程，CCK-8法和流式细胞术评估体外毒性，并建立皮下和播散性AML小鼠模型验证体内疗效。原发性AML细胞来自患者骨髓样本，正常造血毒性测试使用人骨髓CD34⁺细胞。

结构设计与靶点验证
KK2845通过半胱氨酸随机偶联SG3249（含PEG-8间隔臂和SG3199弹头）。SPR显示其特异性结合人和食蟹猴TIM-3，不与小鼠、大鼠或兔TIM-3交叉反应。

高效内化与溶酶体定位
在TIM-3⁺/CD33⁺的Kasumi-3细胞中，KK2845-Alexa488在37°C下2小时内完成内化，24小时后与溶酶体标记共定位，内化效率与CD33-ADC相当。

体外杀伤效力
对Kasumi-3和过表达TIM-3的EoL-1/hTIM-3细胞，KK2845的IC₅₀分别为49.58 ng/mL和1.09 ng/mL，显著优于对照ADC。在13例原发性AML样本中，KK2845对CD34⁺CD38^- LSCs和母细胞均有效，IC₅₀为1-20 ng/mL，与CD33-ADC相当。

ADCC作用与安全性优势
加入健康供体外周血单个核细胞（PBMCs）后，KK2845通过ADCC途径增强杀伤。关键的是，KK2845在1000 ng/mL浓度下仍不影响正常CD34⁺细胞和髓系祖细胞活力，而CD33-ADC在10 ng/mL即产生显著毒性。

动物模型验证
在Kasumi-3和CMK11-5皮下移植瘤模型中，单次0.25-1 mg/kg剂量的KK2845显著抑制肿瘤生长。播散性EoL-1/hTIM-3模型中，0.3 mg/kg KK2845完全清除骨髓中的白血病细胞，生存期显著延长。与venetoclax+阿扎胞苷（Aza）联用时，三药组合较单药或双药方案展现出协同效应。

结论与展望
KK2845通过TIM-3靶向递送PBD二聚体，兼具直接DNA损伤和ADCC效应，对LSCs和母细胞均有效，且规避了CD33-ADC的骨髓毒性。其食蟹猴药代动力学显示血浆稳定性良好。相较于失败的TIM-3中和抗体sabatolimab，KK2845以直接杀伤机制突破免疫抑制微环境限制。目前该药物已进入复发/难治性AML的I期临床试验（jRCT2011240008），有望成为首个靶向TIM-3的临床ADC，为AML治疗提供新范式。