YAP1启动子相关非编码RNA通过调控YAP1表达抑制尤文肉瘤细胞肿瘤发生

本研究针对尤文肉瘤（ES）化疗耐药和转移难题，揭示了YAP1启动子相关非编码RNA（pncRNA_YAP1-1）通过结合FUS蛋白、破坏YAP1-TEAD互作，促进YAP1磷酸化降解的新机制。该发现为靶向Hippo通路治疗ES提供了新策略，论文发表于《Cellular》。

　　

尤文肉瘤（Ewing sarcoma, ES）是儿童和青少年中第二常见的恶性骨肿瘤，具有高度侵袭性和易转移特性。尽管综合治疗将局部患者的5年生存率提高到70%，但25%患者会复发，且多数确诊时已发生转移。化疗耐药和转移倾向是治疗失败的主因，亟需寻找新靶点。近年来，长链非编码RNA（lncRNA）在癌症中的作用备受关注，但ES中YAP1基因的调控机制尚不明确。

意大利圣卢西亚IRCCS基金会和罗马"意大利广场"大学的研究团队发现，YAP1启动子相关非编码RNA（pncRNA_YAP1-1）能通过独特机制抑制ES进展。该研究揭示pncRNA_YAP1-1通过结合RNA结合蛋白FUS，干扰YAP1-TEAD复合体形成，促使YAP1胞质滞留并降解，最终抑制肿瘤生长和转移。论文发表在《Cellular》杂志，为ES靶向治疗提供了新思路。

研究采用多种关键技术：通过生物信息学筛选YAP1启动子区非编码转录本；利用RNA荧光原位杂交（FISH）和亚细胞分级验证pncRNA_YAP1-1定位；采用siRNA敲低和过表达质粒调控基因表达；通过蛋白质互作实验（免疫共沉淀和RNA pull-down）解析分子机制；结合CHX追踪实验和蛋白酶体抑制剂处理评估YAP1蛋白稳定性。

主要研究结果

pncRNA_YAP1-1的发现与特征
通过UCSC基因组浏览器分析发现两个YAP1启动子相关lncRNA（AP001527.1/2），其中pncRNA_YAP1-1在转移来源的TC-71和SK-N-MC细胞中高表达。该RNA无编码潜力，主要定位于细胞核，且在ES患者样本中表达水平与经典lncRNA相当。

pncRNA_YAP1-1的抑癌功能
过表达pncRNA_YAP1-1显著抑制ES细胞增殖、迁移和侵袭能力，但不影响YAP1 mRNA水平。相反，其下调导致YAP1蛋白积累。机制上，pncRNA_YAP1-1通过促进YAP1 Ser¹²⁷位点磷酸化，驱动YAP1胞质滞留和蛋白酶体降解，从而抑制下游靶基因CTGF、CYR61和CCND1的表达。

FUS介导的调控机制
生物信息学预测和RNA pull-down实验证实pncRNA_YAP1-1与FUS蛋白特异性结合。FUS敲除不仅降低pncRNA_YAP1-1稳定性，还解除其对YAP1的抑制作用。进一步研究发现pncRNA_YAP1-1作为"分子诱饵"，竞争性结合TEAD转录因子，破坏YAP1-TEAD致癌复合体的形成。

治疗响应中的调控作用
血清剥夺、mTOR抑制剂RAD-001和化疗药依托泊苷均可上调pncRNA_YAP1-1，进而降低YAP1蛋白水平。而PARP抑制剂奥拉帕尼无此效应，表明该调控具有通路特异性。

结论与意义
该研究首次阐明pncRNA_YAP1-1/FUS轴通过破坏YAP1-TEAD互作、促进YAP1降解的新机制，为ES治疗提供双重靶向策略：既可开发模拟pncRNA_YAP1-1功能的寡核苷酸药物，也可设计针对FUS-YAP1互作界面的抑制剂。鉴于YAP1在多种癌症中的核心地位，这一发现可能具有更广泛的肿瘤治疗价值。研究还提示pncRNA_YAP1-1表达水平可作为ES化疗响应的预测标志物。