妊娠期适应性淋巴细胞亚群的纵向免疫参考区间研究及其临床意义

本综述系统分析了妊娠期间适应性淋巴细胞亚群的动态变化，通过高维流式细胞术（flow cytometry）建立了妊娠各期关键免疫细胞（如CD4+、CD8+ T细胞及B细胞亚群）的参考区间（reference intervals），揭示了母体免疫适应（如PD-L1+ B细胞上升、cTfh细胞抑制）与妊娠并发症的潜在关联，为妊娠免疫监测（immunomonitoring）和风险预测提供了重要依据。

　　

引言

妊娠代表了一种独特的免疫状态，母体免疫系统经历复杂且动态的适应性变化，以维持母体健康并支持胎儿发育。这些变化涉及先天和适应性免疫反应的精细调节，以实现免疫耐受与防御机制之间的最佳平衡，包括细胞因子产生、免疫细胞迁移和免疫应答调节的改变。当前范式支持妊娠早期和晚期存在促炎环境，促进胚胎植入和子宫壁组织重塑，以及分娩相关过程；而妊娠中期则以抗炎机制为主，对胎儿生长发育至关重要。维持这种微妙平衡至关重要，因为适应失调与不良妊娠结局相关，包括早产、子痫前期和胎儿生长受限。此外，孕妇在抗炎阶段可能更容易感染，对母胎造成严重后果。相反，既往存在的母体自身免疫或过敏性疾病进程可能改善、恶化或保持不变，反映了母体免疫适应的复杂性。

研究主要集中于母胎界面的免疫适应，增强了我们对控制母体免疫耐受细胞机制的理解。然而，由于伦理考虑以及母胎对话具有局部和全身效应的强有力证据，研究日益关注妊娠期间母体全身性免疫适应。例如，尽管Th1/Th2平衡的程度和动态仍具背景依赖性且研究间难以重复，但这些亚群的变化在协调妊娠免疫适应中至关重要，并从妊娠早期开始受到调节。同样，调节性T细胞（Tregs）的作用已明确，但其水平和功能的变化仍是活跃的研究领域。

妊娠期间循环B细胞和特定B细胞亚群的减少也在多项研究中被报道，通常伴随着对丝裂原和感染源反应性的降低，尽管关于妊娠早期的数据仍然有限。至于具有调节功能的B细胞（Bregs），研究提出这些细胞在妊娠初期维持胎儿耐受中具有重要作用。然而，缺乏特定的Breg标志物以及研究间用于定义这些细胞的表型异质性阻碍了得出明确结论的能力。

不同免疫细胞类型之间的协调相互作用对于保护性免疫的发展至关重要。滤泡辅助T细胞（Tfh）是这一过程中的核心，它们提供同源和可溶性信号，驱动B细胞增殖、存活、亲和力成熟以及分化为抗体产生细胞和长寿命记忆B细胞。虽然Tfh细胞经典地存在于次级淋巴器官中，但表型相似的较小细胞群也可存在于外周（循环Tfh，cTfh）。这些细胞被认为代表了人类Tfh细胞的记忆库，表达CXCR5并与淋巴驻留对应物具有功能相似性。鉴于其在调节B细胞应答中的作用，cTfh细胞在自身免疫性疾病中得到了广泛研究。然而，它们在妊娠中的作用以及在此背景下对B细胞应答的调节仍知之甚少。需要使用额外的活化和成熟标志物进一步表征滤泡CD4和CD8 T细胞亚群，以阐明妊娠期间滤泡T细胞的动态。

尽管数据不断增长，但对于整个正常生理妊娠过程中适应性免疫反应的变化，特别是关于较少研究的亚群，仍有很多需要了解。为妊娠期的这些免疫波动建立适当的参考范围对于区分生理适应和病理偏差至关重要。精确了解这些变化是识别与妊娠相关并发症相关的免疫偏差、加强母婴护理和监测策略的重要第一步。

材料与方法

在这项前瞻性观察研究中，招募了健康早孕期孕妇（PW），年龄18至45岁，具有自然受孕的生育能力，并在2022年6月至2024年7月期间于Hospital da Luz Lisboa进行随访直至分娩。纳入时的孕龄通过超声或末次月经估算。仅纳入无并发症的单胎妊娠孕妇，且至少经过两次评估且无任何临床相关脱落。按年龄匹配的参加常规年度健康检查的健康非孕女性（NPW）被招募为对照组。

两组的排除标准包括糖尿病、高血压、自身免疫或活动性感染性疾病（包括肝炎、HIV和CMV感染）病史，或任何其他可能 adversely 影响免疫系统或需要免疫调节治疗的医疗状况。其他排除标准包括肿瘤病史和采集外周血样本前六个月内吸烟。使用除维生素、叶酸和铁补充剂外的任何产前药物也会导致排除。

所有招募的孕妇必须无相关妊娠并发症史（例如早产、宫内生长受限、新生儿通气、子痫前期、复发性流产），并且在纳入时无 ongoing 妊娠相关并发症。

所有参与者在纳入研究前均签署书面知情同意书，该研究经Hospital da Luz (CES/49/2021/ME) 和NOVA Medical School (167/2021/CEFCM) 伦理委员会批准，并根据最新修订的《赫尔辛基宣言》进行。所有实验室和临床数据在分析前均经过匿名化处理。

为孕妇组安排了三次访视，对应于常规临床评估，分别在妊娠第1、第2和第3孕期进行。非孕对照组采样一次，以提供基线参考值进行比较。外周血样本在每次计划访视时通过静脉穿刺采集到EDTA包被和肝素化的试管中。每次访视时，还制备了血清样本，分装并保存在-80°C，用于未来可能的可溶性介质分析。

所有参与者入组时收集的基线数据包括人口统计学（年龄）、人体测量学（体重指数，BMI）、产科史以及收缩压和舒张压。额外的临床参数，包括全血细胞计数，在每次访视时从医院病历中检索。

对于孕妇参与者，分娩当天收集的数据包括孕龄和分娩方式。对于新生儿，记录的数据包括性别、体重以及1分钟和5分钟Apgar评分，这是一种基于外观、脉搏、皱眉、活动和呼吸对新生儿状态的标准评估，每项评分0-2，总分范围0-10。7-10分表示正常的新生儿适应。

全血细胞计数由医院检验医学服务使用自动化血液分析仪（XN-10?, Sysmex）测定。

为确保样本间的适当标准化并最小化随机处理错误，使用两个经过预验证的8色荧光标记单克隆抗体面板（共14个独特标志物）用于T和B细胞亚群的识别和定量。两个面板均以来自ExBio（Praha, Czech Republic）的单管冻干抗体混合物形式提供，并按照制造商说明进行处理。简言之，100 μL EDTA抗凝全血细胞，用2 mL BD FACS Flow（BD Biosciences）预洗，与试管中的单克隆抗体孵育20分钟，然后用EXCELLYSE Easy溶液处理10分钟。随后用2 mL BD FACS Flow（BD Biosciences）在300xg下洗涤5分钟，并在方案完成后30分钟内在流式细胞仪上获取。所有步骤在室温下进行。共表征了74个淋巴细胞亚群，表示为绝对计数或各自母细胞群的分数。这包括根据Sanz及其合作者描述的B细胞亚群表征。

绝对T和B细胞计数通过将流式细胞术获得的相对频率乘以患者全血细胞计数结果提供的绝对淋巴细胞计数来计算。所有分析均在采血后2小时内进行，流式细胞术获得的淋巴细胞百分比与全血细胞计数报告的一致。

为评估刺激诱导的CD69和PD-L1在B和T细胞表面的表达，将肝素化全血样本用Iscove改良杜尔贝科培养基（IMDM, Corning?）1:1稀释，并在37°C、5% CO₂气氛中孵育5小时，不加（未刺激）或加（刺激）佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯（PMA）（50 ng/mL, Sigma Aldrich）、钙离子载体（1 μg/mL, Sigma Aldrich）和脂多糖（LPS）（10 μg/mL, Sigma Aldrich）的组合。孵育后，用BD PharmLyse?裂解缓冲液（BD Biosciences）裂解红细胞，并对样本进行表面标志物（即抗CD45、抗CD3、抗CD8、抗CD19、抗CD69和抗PD-L1抗体）染色，用2 mL BD FACS Flow（BD Biosciences）在300xg下洗涤5分钟，并在30分钟内在细胞仪上获取。

所有采集均在8色BD FACS Canto II流式细胞仪（BD Biosciences, San Jose, CA, USA）上使用BD FACS Diva软件版本8.0.2（BD Biosciences）进行。Infinicyt? 2.0（Cytognos, SL. Salamanca, Spain）软件用于文件质量控制和分离淋巴细胞群体。然后导出FCS文件，并在FlowJo? v10.6.2（BD Biosciences）软件中进行下游分析以确定亚群频率。使用制造商提供的对应于每种抗体的冻干细胞基试管生成单色补偿对照。这些对照根据供应商说明每批次获取一次，以建立补偿矩阵。

所有抗体面板和亚群分析的详细信息见补充表1和2。代表性样本的设门策略见补充图1-4。

使用Dotmatics的OMIQ软件（www.omiq.ai, www.dotmatics.com）进行多色流式细胞术数据的降维。导入所有参与者的FCS 3.0文件，并对每个样本中最多5780个CD19⁺细胞和5000个CD3⁺ T细胞进行子采样和串联以进行分析。用于opt-SNE分析的标志物在图注中描述。应用以下默认参数：最大迭代次数=1000，opt-SNE结束=5000，困惑度=30，Theta=0.5，组件=2，详细程度=25。随机种子不是用户选择的，而是在任务启动时由软件自动生成（B细胞管为2136；T细胞管为3556）。

使用GraphPad Prism v10.4.0 for Windows（GraphPad Software, Boston, MA, USA, www.graphpad.com）进行统计分析和可视化。

分类变量以绝对频率和百分比表示，它们之间的关联使用卡方检验或Fisher精确检验进行分析。通过残差的QQ图视觉检查并在必要时使用D'Agostino-Pearson正态性检验评估数据的正态性。

通过混合效应模型与Geisser-Greenhouse校正评估细胞群体的纵向变化，随后使用Tukey多重比较检验进行p值校正。每个亚群的频率和细胞浓度以时间点（孕期）作为固定效应，患者作为随机效应进行建模。使用Brown-Forsythe和Welch ANOVA或普通单因素ANOVA检验（如适用）进行非孕组与每个时间点之间的比较，随后进行Dunnett's T3多重比较检验；否则，使用非参数Kruskal-Wallis检验，随后进行Dunn多重比较检验。

通过混合效应模型进行双向ANOVA，以评估孕期和临床特征（分为两个水平：BMI、年龄、产次和流产史）对每个因变量（每个细胞亚群）的影响。还评估了这些因素之间的相互作用，并使用Tukey多重比较检验进行多重比较。每次比较中的生物学重复数（n）可在与每个结果相关的补充材料中找到。

上述所有分析均在使用ROUT方法排除连续变量的异常值后进行，按照GraphPad的建议，使用Q值为0.1%。所有检验均在包含和不包含异常值的情况下进行以验证其对p值的影响，大多数结果指向相同的方向（显著和不显著值）。此处报告的结果不包括异常值。所有进行的统计检验均为双尾。

使用的每个检验在相应的图和表注中指明。对于所有分析，p值小于0.05被认为显著：* p < 0.05, p < 0.01, * p < 0.001, p < 0.0001。

作为差异程度的度量，效应大小计算如下：

-对于混合效应ANOVA：偏eta方（η_p²），若≥ 0.01 且 < 0.06则为小；若≥ 0.06 且 < 0.14则为中；若≥ 0.14则为大。

-对于非配对t检验/Dunnett检验：Cohen's d（d），若<0.3则为小；若≥0.3 且 <0.8则为中；若≥0.8则为大。

效应大小值在图和/或补充材料中报告，并根据这些值标记为⁺表示小效应，⁺⁺表示中等效应，⁺⁺⁺表示大效应。

对于参考区间计算，遵循CLSI EP28-A3C指南。简言之，测试每个亚群的原始数据的正态性，使用直方图和Shapiro-Wilk检验。使用Dixon-Reed规则识别可能的异常值并在进一步分析前移除。对于偏态分布，测试对数转换以改善正态性并评估是否增强了参考区间估计。由于样本量<120名参与者，使用稳健方法计算下限和上限，使用自助法（10000次迭代，随机数种子978）估计90%置信区间。如果稳健方法产生的上限或下限大大超过观察到的最小或最大值，则使用非参数百分位数（分别为第2.5和第97.5）调整参考范围，以避免创建超出真实世界数据的参考范围。所有分析均使用MedCalc? Statistical Software version 23.1.7（MedCalc Software Ltd, Ostend, Belgium; https://www.medcalc.org; 2025）进行。

结果

研究人群

本研究共招募了60名孕妇和30名非孕女性。在孕妇组中，10名参与者被排除，4名因妊娠并发症，6名因非临床失访，最终队列为50名参与者。孕妇和非孕女性的基线特征见表1，采样时间点分布总结于图1。在孕妇组预期的150份样本中，有7份样本因非临床原因（如未提前通知错过预定预约或转诊至其他医院）未能采集。

平均年龄和BMI在组间相似。在孕妇组中，46%的女性年龄大于33岁，而非孕组的年龄分布更均衡，大约三分之一在每个年龄范围内。关于BMI，两组主要由体重正常（18.5至24.9 kg/m²）的女性组成。两组中大多数女性为未产妇，然而，孕妇组中有一次或多次非连续流产史的女性频率更高。组间在年龄、BMI或产次分布方面未观察到其他显著差异。

第一次访视（T1）的平均孕龄为10⁺⁵周，第二次访视（T2）为25⁺⁵周，第三次访视（T3）为34⁺³周。所有女性均成功分娩，平均分娩孕龄为39⁺³周。关于分娩时间，未记录早产（<37周）或过期产（≥42周）病例，65%的分娩发生在足月（≥39且<41周）。阴道分娩是最常见的分娩方式（60%）。新生儿平均体重为3216克，44%为女性。

各孕期白细胞变化

妊娠期间循环免疫细胞组成的变化已被广泛记录，揭示了不同白细胞亚群的动态变化。与此一致，我们观察到主要白细胞亚群，特别是中性粒细胞和单核细胞的几个显著趋势（图2）。中性粒细胞和单核细胞计数从妊娠早期开始显著增加，而淋巴细胞水平保持稳定且持续低于非孕组。值得注意的是，在几个研究的细胞群体中观察到孕妇和非孕女性之间的显著差异。然而，总体而言，孕妇的所有白细胞亚群均保持在用于健康成年女性的参考范围内。详细的红细胞象和白细胞象结果见补充表3和补充图5。

T和B淋巴细胞亚群 across trimesters

母体免疫系统发生重大适应以确保妊娠成功，这些机制的失调日益被认为与几种妊娠相关并发症的发病机制有关。然而，对于这些免疫变化，特别是关于B和T细胞亚群的变化发生的机制，以及它们如何影响妊娠期间对感染的易感性和免疫介导疾病的进展，仍然缺乏清晰的理解。

在表征的74个细胞亚群中，B和T细胞亚群的频率在所有三个孕期以及与非孕状态相比均观察到差异。图3以无监督方式，使用opt-tSNE说明了B和T细胞群体的总体分布以及各组间分析标志物的表达。

详细来说，24个亚群在妊娠时间点间显示出显著变化（图4A），23个与非孕组相比有显著差异（图4B）。纳入标准定义为平均折叠变化≥1.1（较基线增加10%）或≤0.9，且p < 0.05。我们的发现突出了几个妊娠特异性免疫变异，这些变异在各孕期一致，但也不同于非孕状态（图4）。具体而言，总B细胞、过渡B细胞和无能幼稚B细胞在整个妊娠期间呈现进行性下降，最显著的减少发生在妊娠晚期。这些下降在孕期内部和孕期与非孕比较中均明显。相反，活化幼稚和类别转换记忆B细胞从早孕期到晚孕期增加，表明向B细胞活化增强的转变。这些活化亚群也显著高于非孕女性。

PD-L1⁺ B细胞遵循非线性轨迹，从早孕期到中孕期下降，然后在晚孕期上升。值得注意的是，相对于非孕组，其在早孕期和晚孕期的水平持续较高。一些变化，如在浆母细胞中观察到的变化，仅在孕期内部比较中检测到，而与非孕女性相比则没有。总的来说，这些结果强调了B细胞活性的精细调节、妊娠特异性调节，以平衡免疫耐受和适应以支持胎儿发育。

在T细胞群体中也观察到动态变化，循环非滤泡辅助（non-cTfh）和细胞毒性（non-cTfc）活化亚群显著增加，特别是在妊娠晚期，表明存在强有力的妊娠诱导活化。CD8 T细胞活化在中晚期妊娠尤其突出，无论是在孕期内部比较还是相对于非孕女性，强调了它们在这些阶段免疫适应中的关键作用。

值得注意的是，一些变化在比较孕妇和非孕女性时更为明显。例如，活化的PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ cTfh亚群在孕妇中显著低于非孕对照，但在各孕期之间没有显示出主要变化。这表明cTfh抑制反映了与妊娠相关的基线免疫学转变，而非孕期特异性调节。相反，双阴性（DN）T细胞在整个妊娠期间以及与非孕女性相比持续减少，尽管总CD4和CD8 T细胞水平稳定。这些观察结果表明存在严格调控的免疫适应，特别是在CD8 T细胞区室内，旨在维持对母胎健康至关重要的免疫平衡。所有亚群的详细结果见补充表3。

除了在B和T细胞亚群中观察到的比例变化外，我们观察到妊娠期间总B和T细胞绝对计数的显著减少，伴随着其各自亚群的普遍减少（补充图6）。尽管淋巴细胞计数总体下降，但不同的活化CD4和CD8 T细胞亚群的水平在妊娠晚期显著高于非孕女性。这在PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ non-cTfh细胞、PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ non-Tfc细胞和PD-1^- CD38⁺ HLA-DR⁺ non-Tfc细胞中尤其明显。此外，观察到活化CD4和CD8 T细胞亚群绝对计数的一致增加，与其在母体免疫区室中各自频率的趋势一致。这些发现的详细结果见补充表4。

与妊娠晚期观察到的活化细胞比例增加一致，我们发现表达CD69的CD8^-和CD8⁺ T细胞的基线频率显著更高，特别是在第三孕期（图5），而B细胞未显示显著差异。此外，与非孕女性相比，孕妇中共同表达CD69和PD-L1标志物的CD8^-和CD8⁺ T细胞比例更高，最显著的差异出现在第三孕期。相反，单独表达PD-L1的细胞在CD8^-和CD8⁺ T细胞中在早孕期更常见，但在非孕女性中较少见。

刺激后，基于分析的标志物，妊娠与免疫细胞活化能力的重大变化无关。然而，刺激后在第三孕期观察到CD69⁺PD-L1⁺细胞比例增加。这些发现表明，妊娠与外周CD8^-和CD8⁺ T细胞基线活化的适度增加相关，在妊娠晚期达到峰值，而对其响应刺激的能力没有实质性影响。

详细结果见补充表5。

与临床和人口统计学特征的关联

认识到临床和人口统计学特征的变异性可能影响孕妇组观察到的免疫特征，我们根据关键变量进一步对该队列进行了分层。具体来说，我们检查了产次（未产 vs. 经产）、母亲年龄（<33岁 vs. ≥33岁）、既往流产史（<1次 vs. ≥1次流产）和BMI（<25 vs. ≥25 kg/m2）。显著发现总结于图5，额外的统计细节见补充表6。为确保相关性并最小化混淆，我们仅关注那些相应的非孕亚组（按相同标准分层）未显示显著差异的免疫亚群。

母亲年龄对过渡B细胞和活化幼稚B细胞的水平有微小但显著的影响，这些细胞在年长个体中更高（图6A）。此外，在中孕期观察到母亲年龄与T细胞亚群之间的负相关，特别是在HLA-DR⁺ T细胞、PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ 活化cTfh和PD-1^- CD38^hi HLA-DR⁺ 活化non-cTfc细胞中。母亲年龄与分析的免疫群体绝对计数的变化无关。

在孕妇参与者中，19名女性有至少一次既往流产史。这些女性平均比无此病史的女性年长3.4岁。当按流产史分层时，观察到cTfh细胞百分比的显著差异，以及孕期和流产史之间的显著交互作用（图6B）。既往流产史也与活化PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ cTfh细胞和活化PD-1^- CD38^- HLA-DR⁺ cTfc细胞水平增加相关。基于流产史，在B细胞亚群或分析群体的绝对计数中未发现显著差异。

在我们的队列中，21名孕妇为经产妇，平均比未产妇年长2.5岁。经产参与者在早中期妊娠显示出活化PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ non-Tfc细胞频率增加，以及cTfc和PD-1⁺ cTfc细胞计数更高（图6C）。

当比较低正常体重（BMI < 25 kg/m²）与超重或肥胖（BMI > 25 kg/m²）的孕妇时，观察到几个显著效应（图6D）。超重和肥胖女性在中孕期表现出更高的总B细胞水平，同时在早中期妊娠期间DN2 B细胞和活化幼稚B细胞水平降低。该组在整个妊娠期间持续观察到较低的CD8 T细胞百分比。BMI组间未检测到绝对细胞计数的显著差异。

建立细胞亚群的参考值：计算和临床意义

鉴于观察到的B和T细胞亚群在各孕期的变化以及与非孕组的差异，我们计算了这些亚群在妊娠各期的参考区间，见补充表7和8。为探索其潜在的临床意义，我们将参考值与因不良结局而中止研究的四名参与者的数据进行了比较（图7）。三名参与者因妊娠并发症被转诊至三级中心：羊水过少（DP1）、胎膜早破（DP2）和血管前置（DP3）。一名参与者在早孕期发生稽留流产（DP4）。在所有四个病例中，至少有一个细胞亚群在不良结局发生前的时间点超出了建立的参考范围。共有七个亚群显示出显著偏差，主要是值超过参考上限。其中，CD8 T细胞亚群最常受到影响，特别是活化的HLA-DR⁺ CD8 T细胞、PD-1⁺ non-cTfc细胞和PD-1⁺ CD38⁺ HLA-DR⁺ non-cTfc亚群，表明这些群体的失调与负面临床结局之间存在潜在联系。由于样本量减少，无法进行统计分析。

讨论

细胞组学和单细胞转录组学的进展显著增强了捕捉妊娠期间全身免疫适应复杂性的能力。然而，仍然迫切需要在使用可及的生物区室内对同一个体的免疫动态进行纵向监测。此类方法必须产生快速、可解释且临床可行的见解，流式细胞术为基础的常规免疫表型分析很好地支持了这些能力。

本研究提出了一个高维分析，表征了在正常妊娠期间纵向评估的母体外周血样本中外周免疫T和B细胞群体的表型和功能，并与非孕女性进行了比较。我们验证了先前报道的妊娠期免疫变化，并提供了关于母体外周免疫改变的新见解。此外，我们提出了关键免疫细胞亚群的初步参考区间，为监测妊娠进展和识别可能先于妊娠并发症的早期偏差提供了一个潜在框架。

在整个妊娠期间观察到白细胞亚群的显著变化，中性粒细胞和单核细胞浓度从妊娠早期开始进行性增加，而淋巴细胞水平保持稳定且持续低于非孕女性。这些发现与妊娠期生理性白细胞增多的既定现象一致。植入后的早孕期以炎症细胞因子和生长因子（如粒细胞和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，G-CSF和GM-CSF）的持续水平为特征，这些因子驱动骨髓中的中性粒细胞和单核细胞产生。此外，妊娠相关激素如雌激素和孕激素也可能通过抑制凋亡延长中性粒细胞寿命而促成这些改变。这种先天驱动的炎症在支持伤口愈合、植入后恢复、胎盘形成和子宫重塑中起关键作用。重要的是，尽管外周中性粒细胞和单核细胞数量急剧增加，但它们被功能重编程以促进免疫耐受。中性粒细胞虽然更丰富，但显示出减少的促炎活性，产生抑制T细胞反应的免疫调节介质，同时在蜕膜释放促血管生成因子以支持胎盘发育。妊娠激素和胎盘因子进一步使中性粒细胞偏向抗炎状态，并实现与适应性免疫的串扰，促进分泌IL-10和VEGF的Treg细胞诱导。循环单核细胞同样被胎盘信号重编程。早孕期胎盘外泌体将单核细胞转化为具有高PD-L1表达的M2样状态，导致CD4⁺/CD8⁺ T细胞增殖抑制和Tregs扩增。同时，滋养层微粒引起单核细胞适度分泌TNF-α、IL-6和IL-8，有助于形成受控的炎症环境。在整个妊娠期间，单核细胞经历表观遗传重塑和亚群转变，在中间型CD14⁺CD16⁺细胞中更为显著，到足月时增强了它们的活化潜能。总之，这些先天适应有助于建立母胎耐受，而其失调与子痫前期和流产等并发症有关。

观察到的红细胞象成分的改变和血小板计数的进行性下降是妊娠期有据可查的生理适应，通常归因于血小板转换增加和血液稀释。

在本研究分析的74个