外源性VWF前肽补充纠正2A/ⅡC型血管性血友病多聚化缺陷

本研究针对2A/IIC型血管性血友病(VWD)患者VWF多聚化缺陷的治疗难题，通过体外实验和转基因小鼠模型证实，外源性补充VWF前肽(VWFpp)可有效恢复突变VWF的多聚化能力，显著提升VWF胶原结合活性(VWF:CB)至71.2±12.7%，并持续改善出血表型16周，为VWD基因治疗提供了创新性策略。

　　

血管性血友病(von Willebrand disease, VWD)作为最常见的遗传性出血性疾病，其治疗长期以来依赖替代疗法，而根治性基因治疗却因血管性血友病因子(von Willebrand factor, VWF)基因尺寸过大而进展缓慢。特别是在2A/IIC型VWD中，VWF前肽(von Willebrand factor propeptide, VWFpp)的基因变异导致VWF多聚化过程受损，使得患者血液中缺乏正常形式的高分子量多聚体，从而引发严重的出血倾向。VWFpp在生理条件下作为pH敏感的分子模板，指导VWF单体的正确组装，这一特性启示研究人员：通过外源性补充功能性VWFpp或许能够逆转因前肽缺陷导致的多聚化异常，为这类疾病的治疗开辟新途径。

本研究发表于《Molecular Therapy》，团队通过体外共表达实验和体内基因治疗两个层面系统验证了外源性VWFpp的治疗潜力。关键技术方法包括：利用体外细胞共表达系统评估八种2A/IIC型VWD致病变异体对VWFpp补充的响应；构建携带p.Tyr87Ser突变的转基因小鼠模型；采用AAV9载体搭载内皮特异性启动子驱动VWFpp表达进行体内递送；通过VWF胶原结合试验(VWF:CB)和多聚体分析评价治疗效果。

体外共表达证实VWFpp可恢复多聚化

研究人员将野生型VWFpp与八种不同的突变型全长VWF在体外共表达，发现所有变异体均表现出多聚化程度的轻度但一致的改善。值得注意的是，具有D2:D2界面缺陷的变异体所需VWFpp浓度较低，而D2:D2界面完整的变异体则需要更高剂量的VWFpp才能实现多聚化挽救。

转基因小鼠模型验证体内疗效

在携带p.Tyr87Ser突变的2A/IIC型VWD小鼠模型中，经AAV9-VWFpp治疗后，VWF多聚化得到显著恢复。VWF:CB水平从基线值的15.8±10.2%提升至71.2±12.7%，疗效持续至少16周。表型方面，小鼠出血倾向得到纠正，血小板功能明显改善。

研究结论表明，无论是体外还是体内实验，外源性VWFpp的补充均能够有效纠正由VWFpp变异引起的多聚化缺陷。该策略规避了全长VWF基因递送的技术瓶颈，为2A/IIC型VWD提供了新型治疗思路。值得注意的是，VWFpp分子量小、易于递送，且其疗效具有变异体类型依赖性，这为未来个体化治疗方案的设计提供了重要依据。此外，该研究首次证实了“分子模板补充”理念在VWD治疗中的可行性，为其他蛋白质组装缺陷性疾病提供了借鉴。