异体干细胞工程化EGFRvIII特异性CAR-NKT细胞治疗胶质母细胞瘤：提升疗效与安全性的新策略

本研究针对胶质母细胞瘤（GBM）治疗中存在的肿瘤抗原逃逸、免疫抑制微环境及治疗毒性等问题，开发了基于造血干细胞基因工程的可规模化生产的异体EGFRvIII-CAR-NKT细胞（AlloECAR-NKT）。研究证实该细胞具有多重抗肿瘤机制，包括CAR/NK介导的肿瘤杀伤及TCR靶向免疫抑制细胞，在动物模型中展现显著疗效且安全性良好，为GBM提供了新一代现成免疫治疗方案。

　　

胶质母细胞瘤（Glioblastoma, GBM）是成人中最常见且最具侵袭性的原发性脑肿瘤，尽管现有治疗手段包括手术切除、放疗、化疗及靶向药物已广泛应用，但其预后仍极差，患者中位生存期仅约15个月。这种治疗困境主要源于GBM的高度异质性、肿瘤抗原逃逸（即肿瘤细胞通过改变抗原表达避免被免疫系统识别）以及高度免疫抑制的肿瘤微环境（Tumor Microenvironment, TME）。近年来，嵌合抗原受体T细胞（Chimeric Antigen Receptor T-cell, CAR-T）疗法在血液肿瘤中取得突破，但在实体瘤尤其是GBM中的应用仍面临诸多挑战，包括治疗相关毒性（如细胞因子释放综合征，Cytokine Release Syndrome, CRS）、自体细胞制备流程复杂以及免疫抑制微环境的限制。

为此，研究团队尝试利用自然杀伤T细胞（Natural Killer T cells, NKT）——一类兼具天然免疫和适应性免疫特性的细胞亚群——作为新型细胞治疗的载体。NKT细胞凭借其固有T细胞受体（invariant TCR）可识别CD1d分子提呈的脂类抗原，从而靶向免疫抑制性CD1d⁺细胞，调节肿瘤微环境。本研究通过结合造血干细胞和祖细胞（Hematopoietic Stem and Progenitor Cells, HSPC）基因工程与无饲养层扩增分化技术，成功构建了靶向EGFRvIII（一种常见于GBM的突变抗原）的异体型CAR-NKT细胞（^AlloECAR-NKT），旨在提供一种兼具强效抗肿瘤活性和良好安全性的现成（off-the-shelf）免疫治疗产品。该成果发表于《Molecular Therapy》，为GBM的临床治疗提供了新的方向。

研究人员主要采用了几项关键技术：首先，利用临床级可扩展平台，通过HSPC基因工程导入抗EGFRvIII的CAR结构；其次，采用无饲养层体外分化体系诱导生成CAR-NKT细胞，确保细胞质量和功能稳定性；此外，研究使用了包括皮下和原位脑肿瘤人源化小鼠模型在内的多种体内模型，以模拟临床实际情况并评估细胞分布、毒性和疗效；细胞抗肿瘤机制则通过体外共培养实验、细胞因子检测和免疫细胞亚群分析等进行验证。

研究设计与细胞构建

研究人员通过HSPC基因工程联合无饲养层分化技术，成功生成可特异性识别EGFRvIII的异体CAR-NKT细胞（^AlloECAR-NKT）。该细胞同时表达CAR结构、固有TCR以及自然杀伤受体，赋予其多重杀伤机制。

抗肿瘤活性与多重机制验证

在体外实验中，^AlloECAR-NKT细胞展现出高效的肿瘤细胞杀伤能力，不仅经由CAR特异性识别EGFRvIII⁺肿瘤细胞，还通过NKG2D等自然杀伤受体靶向多种肿瘤细胞系。同时，这类细胞可通过invariant TCR结合TME中的CD1d⁺免疫抑制细胞（如肿瘤相关巨噬细胞），降低免疫抑制并重塑微环境。

体内疗效与安全性评价

在皮下及原位脑肿瘤人源化小鼠模型中，^AlloECAR-NKT治疗显著抑制了肿瘤生长并延长生存期。重要的是，与常规CAR-T细胞相比，该细胞在脑中滞留性更好，全身泄漏较少，有效降低外周器官中的CRS相关细胞因子水平，表明其具有更优的安全性特征。

讨论与结论

本研究通过创新性的细胞工程策略，成功开发出具有多重抗肿瘤机制的异体型CAR-NKT细胞。其不仅能直接杀伤肿瘤，还可调节免疫微环境，克服了传统CAR-T疗法在实体瘤中的应用瓶颈。此外，异体细胞平台的建立解决了自体细胞制备周期长、批次间差异大等问题，更适合规模化生产和临床推广。该研究为GBM及其他实体瘤的免疫治疗提供了新思路，兼具显著的疗效提升和安全性优势，具有重要的临床转化价值。