基于分析质量源于设计(AQbD)的拉米夫定及其杂质稳定性指示方法的开发与验证

本研究针对拉米夫定制剂质量控制需求，采用分析质量源于设计(AQbD)框架，开发了可同时测定API及其杂质的高效液相色谱(HPLC)方法。通过实验设计(DoE)和蒙特卡洛模拟确定了方法可操作设计区域(MODR)，结合强制降解实验验证了方法的稳定性指示能力，最终建立包含保护带的控制策略，显著提升了方法稳健性和决策可靠性。

　　

在艾滋病治疗领域，拉米夫定作为关键抗逆转录病毒药物，其质量管控直接关系到患者用药安全。然而当前药典方法存在明显局限：无法在单一色谱条件下实现API与制剂中所有杂质的完全分离，且传统单因素(OFAT)验证模式难以确保方法全生命周期的稳健性。更严峻的是，随着巴西公共卫生机构Farmanguinhos（菲奥克鲁兹）开发300mg新剂型，现有分析方法已无法满足国际人用药品注册技术协调会(ICH) Q8要求的质量源于设计(QbD)标准，亟需建立整合科学风险评估与系统优化的新型分析方法。

针对这一挑战，巴西菲奥克鲁兹的研究团队在《Journal of Pharmaceutical Sciences》发表创新成果。研究采用分析质量源于设计(AQbD)理念，以美国药典(USP)方法为起点，通过定义分析目标概况(ATP)明确方法性能要求，运用实验设计(DoE)和蒙特卡洛模拟等关键技术，成功开发出首个能同步检测拉米夫定原料药和制剂中所有关键杂质的稳定性指示方法。

关键技术包括：1) 基于ATP建立关键方法属性(CMA)与参数(CMP)的关联模型；2) 采用中心复合设计优化色谱条件；3) 通过蒙特卡洛模拟确定MODR边界；4) 结合强制降解实验验证方法特异性；5) 运用自上而下(top-down)方法计算测量不确定度并设定保护带。

Analytical target profile and critical method attributes
研究团队首先明确定义ATP要求：方法需在90-110%范围内准确测定API含量，并能检测杂质E、G、H及其他单个杂质（≤0.3%）。据此设定关键方法属性(CMA)包括：拉米夫定与杂质G分辨率≥2.0，杂质E与相邻峰分离度≥1.5，所有峰拖尾因子≤2.0。

Chemical and reagents
实验采用C18色谱柱，建立二元流动相系统：A相为18.2mM甲酸铵缓冲液(pH 5.7):甲醇(97:3)，B相pH 3.8。通过风险识别确定柱温、流速、进样量等12个潜在关键参数。

Conclusions
最终方法在MODR内展现出卓越稳健性：成功分离USP方法未能分辨的杂质对（如杂质C与降解产物），强制降解实验证实方法可检出酸/碱/氧化条件下所有降解产物。通过建立基于测量不确定度的保护带策略，将错误判定风险控制在0.1%以下。

这项研究的重要意义在于：首次将AQbD全流程应用于抗艾滋病药物分析，创建的方法较药典方法提升约30%的分离效能；提出的MODR-不确定度联动控制策略，为ICH Q14指南实施提供了实践范本；开发的保护带计算模型，可推广至其他高变异药品的质量控制。特别值得注意的是，该方法已成功转移至巴西国家药品质量控制实验室，用于保障300mg新剂型的上市后监管，预计每年可避免约200万美元的潜在质量事故损失。