RT-LAMP技术特异性检测花生环斑病毒与番茄斑萎病毒的新型分子诊断方法

《Journal of Plant Pathology》：Visual loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for specific detection of groundnut ringspot and tomato spotted wilt orthotospoviruses

本研究针对花生环斑病毒(GRSV)和番茄斑萎病毒(TSWV)田间检测难题，开发了逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术。该技术通过设计核蛋白基因特异性引物，可实现5 pg/μl灵敏度检测，较RT-PCR更具优势，为重要作物病毒病早期诊断提供高效工具。

　　

花生环斑病毒(Groundnut ringspot virus, GRSV;Orthotospovirus arachianuli)和番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV;Orthotospovirus tomatomaculae)作为全球农作物的重要病原，因其广泛的寄主范围和蓟马传播特性，给病害防控带来巨大挑战。传统血清学和分子检测方法存在局限性，亟需开发早期精准检测技术。

本研究建立逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP)方法，用于番茄、辣椒和花生植株中GRSV与TSWV的特异性检测。研究人员针对两种病毒的核蛋白基因设计特异性引物组，在健康植株中呈阴性反应，且与近缘病毒无交叉反应。该方法在总RNA样本中检测灵敏度达5 pg/μl，显著优于RT-PCR技术。田间病株检测进一步验证该技术的可靠性。

该研究首次报道GRSV特异性RT-LAMP检测体系，为重要经济作物病毒病的早期诊断提供快速、高灵敏度的分子检测工具，对改进病害防控策略具有重要价值。