通过适配体驱动的T7 RNA聚合酶扩增技术实现蛋白质生物标志物的超高灵敏度多重检测

《Analytical Chemistry》：Ultrasensitive Multiplexed Detection of Protein Biomarkers via Aptamer-Driven T7 RNA Polymerase Amplification

血清中蛋白质生物标志物的高灵敏度荧光检测系统，采用aptamer驱动T7 RNA聚合酶级联放大技术，通过红绿荧光逻辑实现直观临床解读，验证显示回收率90-110%并与ELISA一致。

　　

在复杂的生物流体中准确且多重检测蛋白质生物标志物对于早期诊断和精准医疗至关重要。然而，现有技术在灵敏度、特异性、多重检测能力和操作简便性之间存在关键权衡。基于抗体的检测方法（如ELISA）往往缺乏早期检测所需的灵敏度，而核酸扩增方法则不适用于蛋白质目标，并且需要复杂的工作流程。这迫切需要一种简单、高灵敏度且无干扰的方法来同时检测实际样本中的蛋白质。在这里，我们报道了一种由适配体驱动的T7 RNA聚合酶级联扩增系统，可以直接在血清中可视化、双通道检测蛋白质生物标志物。该平台将目标识别转化为等温RNA转录，通过荧光RNA染料复合物产生红色或绿色荧光。使用甲胎蛋白和人血清白蛋白作为模型，该系统实现了每毫升飞克级的灵敏度、出色的特异性以及宽的线性检测范围。红绿荧光逻辑使得临床解释更加直观。通过加标样本和临床样本的验证，显示回收率在90%到110%之间，并且与ELISA结果高度一致。这些发现表明，响应蛋白质的核酸电路可以实现精确的多重检测，且无需仪器进行信号放大。通过整合分子识别、信号放大和可视化读数，这一策略提供了一个可扩展的即时诊断框架，有助于推动蛋白质调控的合成生物学发展。